ГОСТ Р 53214—2008
Т а б л и ц а 1— Схема, иллюстрирующая пересечение между последовательными стадиями и включением кон
троле^
Контрольная
стадия
Контроль
окружающей
среды1’
Пустой
контроль
экстракции1
Положитель Положитель ОтрицательКонтрольКонтроль
ный контроль ный контроль ный контроль реагентов ам ингибирования
экстракций3 иелеаой ДНК* целевой ДНК1 плификации^ПЦР"
Гомогенизация
Рекоменду
ется
Экстракция
нуклеиновых
кислот
Л
Один
на серию
Обязатель
ный с регу
лярными
интервалами
Оценка
качества
нуклеиновых
кислот
4
4-
4
Амплификация
нуклеиновых
кислот
4
4
4
Обязатель
ный
Рекоменду
ется
ный
которы
Рекоменду
Обязатель
ется. но в
х
не
случаях обя
зательный*
Оценка
результатов
амплификации
4
нуклеиновых
кислот
44
♦
44
Интерпретация
44
«Г
44
Отчет об
исследовании
44
*
*
44
а Стрелки указывают, что этот контроль следует применять и на последующих стадиях.
ь Использование контроля окружающей среды поможет лаборатории идентифицировать источники контами
нации на ранней стадии и для идентификации, в каком рабочем помещении присутствует контаминация.
с По крайней мере один пустой контроль должен быть включен каждый раз. когда ДНК экстрагируется из одно
го или более образцов. Пробирка должна всегда быть последней в каждой серии. Может быть подходящим поме
щать одну пустую экстракцию, например, в штатив из восьми пробирок или на микроплашку на 96 лунок для
автоматической экстракции.
й Положительный контроль экстракции должен регулярно включаться и во всех случаях, когда используется
новая партия реактивов для экстракции. Если что-то не так с реактивами или с проведением протокола экстрак
ции. то этот контроль это выявит.
0 Положительный контроль целевой ДНКдемонстрирует способность процедуры амплификации нуклеиновой
кислоты обнаружить образец нуклеиновой кислоты ГМО или целевого таксона. Это условие может также быть вы
полнено с помощью соответствующего положительного контроля экстракции.
1 Отрицательный контроль целевой ДНК демонстрирует способность процедуры амплификации нуклеиновой
кислоты избежать ложноположительной амплификации а отсутствие образца нуклеиновой кислоты ГМО или це
левого таксона.
8 Контроль реагентов амплификации демонстрирует отсутствие загрязняющей нуклеиновой кислоты в ис
пользуемой партии реактивов для ПЦР. Контроль реагентов амплификации может быть опущен, когда использу
ется пустой контроль экстракции.
h Контроль ингибирования ПЦР может использоваться для демонстрации отсутствия растворимых ингибито
ров. Это также может быть продемонстрировано путем серийных разведений матричной нуклеиновой кислоты
Однако должны быть сделаны некоторые типы оценки эффекта растворимых ингибиторов на результаты анализа
образца.
1 Контроль ингибирования ПЦР является обязательным, если все исследования образца с помощью ПЦР
были отрицательными и для продуктов, для которых выход амплифицируемой ДНК неизвестен.
9