ГОСТ Р 53214—2008
мациомных целей. Величины LOD. полученныеизданных совместных испытаний лабораторий, обычно
ссылаются на наиболее низкое количество компонента, котороедает ложноотрицательный результат
не более 5 % с относительным стандартным отклонением воспроизводимости не более 33 %. Однако
некоторыеуровникомпонента, превышающиеэту величинуили недостигающиеее. могутиметьотноси
тельное стандартное отклонение воспроизводимости превышающее 33 %; с подробностями можно
ознакомитьсяв соответствующем приложении. Для количественныхметодов LODсоответствуетнаибо
лее низкому уровню компонента, для которого относительное стандартное отклонение воспроизводи
мостидолжно быть не более 33 % [б].
Фактический LOD — наименьшее относительное количество целевой ДНК. которое может быть
обнаружено, дающее известное (определенное/рассчитанное) число копий генома целевого таксона.
Для расчета числа копий, основанного на молекулярной массе генома соответствующего вида, следует
использовать размеры генома, приведенные в [11]. Фактический LOD связан с анализируемой пробой,
качестеом/количеством матричнойДНК иабсолютным LOD метода.
Для тех матриц, для которых отсутствуют валидированный метод или находящийся во взаимно
однозначномсоответствии LOD. лабораториидолжнысообщатьфактическийLOD. основанный на внут
реннемопытеработы, или констатировать, чтодляэтихматрицоннеизвестен, исделатьссылкуна вали
дированный LOD на специфической матрице.
4.3.3 Предел количественного определения (LOQ)
Величины LOQ для каждого аналитического метода, как указано в приложениях к ИСО 21569 [1],
ИСО 21570 [2] и ИСО 21572 [4]. основаны наданных валидации, проводенной совместными испытания
ми лабораторий и/или заявлений разработчиков методов, и включены только для информационных
целей. Величины LOQ. полученные изданных совместных испытаний лабораторий, обычно ссылаются
на наиболее низкое количество компонента, котороедает относительное стандартное отклонение вос
производимостино более 25 %. Однако некоторые уровни компонента, превышающие эту величинуили
недостигающие ее, могут иметь относительноестандартноеотклонениевоспроизводимости, превыша
ющее 25 %: с подробностями можноознакомиться в соответствующем приложении исм. [2] и[6].
Фактический LOQ — наименьшее относительное количество целевой ДНК, которое может быть
достоверно количественно определено, дающий известное (определенное/рассчитанное) число копий
генома целевого таксона. Для расчета числа копий, основанного на молекулярной массе генома соот
ветствующего вида, должны использоваться размеры генома, приведенные в [11]. Фактический LOQ
связан с анализируемой пробой, качеством/количеством матричнойДНК иабсолютным LOQ метода.
Для тех матриц, для которых отсутствуют валидированный метод или находящийся во взаимно
однозначном соответствии LOQ, лаборатории должны сообщать фактический LOQ. основанный на
внутреннем опыте работы, или констатировать, чтодля этих матриц он неизвестен исделатьссылку на
валидированный LOQ на специфической матрице.
5
Общие требования клаборатории и процедурам
5.1. Общие положения
Процедура включает всебя следующие стадии:
- получение репрезентативной пробы;
- гомогенизациялабораторной пробы;
- уменьшениелабораторной пробыдо размеров анализируемой пробы:
- подготовка и измельчение пробы:
- экстракция анализируемого компонента;
- испытание, интерпретация иотчето результатах.
Инструкции, специфическиедля той или иной процедуры, содержатся в основном тексте и в инди
видуальных приложениях к ИСО 21569 [1]. ИСО 21570 [2]. ИСО 21571 [3] и ИСО 21572 [4].
5.2 Использование контролей
Должны бытьиспользованы контроли всоответствиистаблицей 1.Эта таблица примениматолько
кметодам, основанным наопределенииДНК. Контроли, применимыекметодам, основанным наопреде
лении белка, описаны в ИСО 21572 [4].
8