ГОСТ Р 52816—2007
24 или 48 ч, после этого в этих пробирках отмечают наличие газа и/или помутнения, мешающего выявле
нию образования газа.
4.2.4 Пробирки с подтверждающей средой инокулируют культурами из пробирок с обогатительной
селективной средой двойной концентрации и культурами из пробирокс обогатительной селективной средой
нормальной концентрации, в которых отмечено образование газа и/или помутнение.
Посевы в пробирках с подтверждающей средой инкубируют при температуре 37 °С 24 или 48 ч. после
этого в пробирках отмечаютобразование газа.
4.2.5 Наиболее вероятное число колиформных бактерий в 1см3или 1г пробы продукта (НВЧ) рассчи
тывают исходя из числа пробирок с подтверждающей средой (4.2.4). показавших образование газа. Для
определения наиболее вероятного числа пользуются таблицей
ГОСТ26670.
5 Методы определения количества колиформных бактерий —
подсчет колоний
Сущность методов
Методы определения количества колиформных бактерий посевом в
или
на авизованные селектив
но-диагностические среды основаны на высеве определенного количества продукта и/или его разведений
в или на агаризованную селективно-диагностическую среду с лактозой, инкубировании посевов, подсчете
типичных и атипичных колоний, пересеве типичных и атипичных колоний в жидкую селективную среду
с лактозойдля определения газообразования,
подтверждения, принеобходимости, по
биохимическимпри знакампринадлежности выделенных колонийкколиформнымбактериям.
5.1 Метод посева в агаризованную селективно-диагностическую среду
5.1.1 Для определения количества колиформных бактерий по 1см3 продукта, если продукт
жидкий, или по 1 см3 исходного разведения в случае другого продукта вносят в две стерильные чашки
Петри.
Другую пару чашек используют для других количеств — исходной суспензии и/или десятикратных
разведений продукта.
Чашки с внесенным в них продуктом или его разведением заливают агаризованной питательной
средой.
Посевы в чашках инкубируют при температуре 37 *С в течение 24 ч.
5.1.2
Типичные и атипичные колонии подсчитывают и определяют у бактерий из типичных и
атипичных колонийвозможность ферментациилактозы.
5.1.3 Число колоний на 1 см3 или на 1 г продукта рассчитывают
по ГОСТ 26670
исходя из числа
подтвержденных типичных и атипичных колоний, выросших на чашках.
5.2
Метод посева на агаризованную селективно-диагностическую среду
5.2.1Наподсушенную поверхность агаризованнойселективно-диагностической средыв двух чаш
кахПетринаносят0.1
—
0.2см3продукта, еслипродукт жидкий, илиисходной суспензии
в
случаедруго
гопродукта.
Другуюпару чашекиспользуют для другихколичеств — исходной суспензии илидесятикратных
разведений продукта.
Внесенный в чашкипродукт илиегоразведения распределяютпо поверхностиагаризованнойпи
тательнойсредыстерильным шпателем.
Посевы в чашках инкубируют притемпературе 37 ’С в течение 24 ч.
5.2.2 Типичные и атипичные колонии подсчитывают и определяют у бактерий из этих колоний
возможность ферментациилактозы.
5.2.3 Число колоний на 1см3или на 1 г продукта рассчитывают по ГОСТ 26670 исходя из числа
подтвержденныхтипичных и атипичныхколоний, выросшихна чашках.
6 Питательные среды и реактивы
Химические вещества, используемые для приготовления питательных среди реактивов, должны быть
аналитического качества.
6.1 Селективная обогатительная среда (лаурил сульфат триптозный бульон)
6.1.1 Состав среды приведен в таблице 1.
185
3