ГОСТ Р 52816— 2007
колиформных бактерий определяют, исходя из процентного отношения подтвержденных колоний к
общему количеству колоний, взятыхдля подтверждения.
Пересчет количества колиформных бактерий, определенного посевом в или на агариэоваиные среды,
на 1 г (см3)продукта проводят
по ГОСТ26670.
Результаты определения количества колиформных бактерий и выявления их вопределенной навеске
продукта записывают
поГОСТ26670.
9.3.6Допускается также выявление колиформных бактерий проводить посевом в или на ага-
ризованную среду приусловии, что навескупродукта, в которой предусматривается выявление, воз-
можнопосеять по этомуметоду.
При выявлении колиформных бактерий посевом в или на агаризованную среду
подсчета
количе
ства колонийне проводят.
10 Дополнительное подтверждение принадлежности выявленных
бактерий к колиформным бактериям
10.1 При необходимости, для дополнительного подтверждения принадлежности бактерий,
выросшихнажидкихсредах(там. где отмеченогазообразование), к колиформнымбактериям делают
пересевыпо ГОСТ26670на поверхность одной из агаризованных селективно-диагностических сред
(6.5 — 6.7). Посевы инкубируют при температуре (37
±
1) СС в течение (24
±
3) ч. После тврмос-
татирования отмечаютрост типичных и атипичныхколоний.
10.2Длядополнителыюго подтверждения принадлежностивыросших бакпюрийкколиформным
бактериямотбираютне менее чем по пять типичныхи атипичныхколонийиз чашекПетри спосева
ми по 9.3.3.
Атипичныеколонии отбирают те. в копюрыхподтвержденоналичиеколиформныхбактерий по
севом в жидкуюподтверждающую среду.
10.3 Каждую отобранную для подтверждения колонию пересевают на поверхность скошенного
питательногоагарапо 6
.9
или 6.10. посевытермостатируютпри температуре (31 ±1)°С в течение
(24 ± 3) ч.
Принадлежность к колиформным бактериям определяют по отношению к окраске по Граму. по
отсутствию оксидазы. по ферментации пактозы на среде Гисса.
10.3.1 Окраска по Граму
Приготовлениемазковизкультур, выросших на скошенной поверхности питательного агара,
и окраску их по Гоаму. проводят по ГОСТ30425. Колиформные бактерииявляются грамотрицатель-
ными палочками.
Допускаетсяокраскупо Гоамузаменять тестомГовгорсена. для этогона предметномстекле в
капле 3 %-ного водногораствора калия гидроокиси эмульгируют петлейкультурумикроорганизмов,
взятую изколонии сплотной среды. Если через несколькосекундза петлейтянутсяслизистыенити,
тоэто указывает напринадлежность испытуемой культурык грамотрицательномувиду. Уграмполо-
жительных бактерийслизистыхнитейне образуется.
10.3.2 Определение отсутствия оксидазы
Определениеотсутствияоксидазыпроводятпо ГОСТ29184.
Для определения оксидазы допускается использованиедисков и растворовотечественного и им
портного(зарегистрированных вРоссийскойФедерации) промышленногопроизводства. Дляконтроля
качества дисков и растворов используют музейные оксидазоположительные и оксидазоотрицапюль-
ныв культуры.
10.3.3 Определение ферментации лактозы
Для определения ферментации лактозы испытуемую культурувысеваютуколомв средуГисса
слактозой.
Посевытермостатируют при температуре (37 ± 1) °Св течение (24 ± 3) ч.
Колиформные бактерииферментируютлактозу собразованиемкислоты (цветсредыменяет
ся) и газа.
193
11