ГОСТ Р 52816— 2007
При выявлении колиформных бактерий отмечают присутствие или отсутствие их в навеске
х
г или
хсм3продукта.
9.2 Метод НВЧ — определение количества колиформных бактерий
При определении количества колиформных бактерий по методу НВЧ высевают не менее трех после
довательных навесок продукта и (или) его разведений, отличающиеся по количеству продукта в них в
10 раз.
9.2.1 Навеска, исходная суспензия и разведения
Отбор навесок, приготовление исходного разведения и десятикратных разведений проводят
поГОСТ26669.
Готовят достаточное число разведений
по ГОСТ26669.
гарантируя, что все пробирки, соответствую
щие конечному разведению, покажут отрицательный результат.
9.2.2 Инокуляция и инкубация
9.2.2.1 Используют три пробирки для каждой навески продукта и (или) его разведения.
3.2.2.2 Стерильной пипеткой переносят в каждую из трех пробирок с одной из селективных обогати
тельных сред двойной концентрации (см. таблицы 1а. 2а. За ] 10 см3пробы, если она жидкая, или 10 см3
исходной суспензии при использовании других продуктов.
Каждую навеску продукта в трехкратной повторности высевают в среду двойной концентрации в
пробирки размером 20 х 200 мм.
Соотношениемеждуколичествомвысеваемогопродукта и питательнойсредой двойнойконцен
трации 1:1.
9.2.2.3 Другой стерильной пипеткой переносят в каждую из трех пробирок с одной из селективных
обогатительных сред нормальной концентрации (см. таблицы 1б. 26.36] 1 см3пробы, если продукт жидкий,
или 1 см3исходной суспензии при использовании других продуктов.
Каждую навеску продукта и (или) его разведения в трехкратной повторности высевают в пробирки
размером 16 х 160 мм.
Соотношение между количеством высеваемого продукта или его разведением и питательной
средой 1:10.
3.2.2.4 Каждое последующее разведение высевают в соответствии с 9.2.2.3, используя новую сте
рильную пипетку. Осторожно перемешивают ииокулум и среду.
3.2.2.5 Пробирки с посевами в средудвойной концентрации (см. Э.2.2.2) инкубируют при температуре
(37 ± 1) °С в течение (24 ± 2) ч.
3.2.2.6 Пробирки с посевами в среду нормальной концентрации (см. 9.2.2.3 и Э.2.2.4)инкубируют при
температуре (37 ± 1) °С втечение (24 ± 2)ч. Если нет образования газа и/или помутнения, препятствующего
выявлению образования газа, продолжают инкубирование еще (24 ± 2) ч.
9.2.3 Подтверждение
9.2.3.1 Из каждой пробирки после инкубации по 9.2.2.5 инокулируют петлей подтверждающую среду
(6.
16—6.46).
Посевы инкубируют в термостате при температуре (37 ± 1) "С в течение (24 ± 2) ч. Если нет
образования газа и/или помутнения, то продолжают инкубирование еще (24 ± 2) ч.
В качестве арбитражной среды используют бриллиантовый зеленый лактозный желчный бульон.
9.2.3.2 Повторяют процедуру, описанную в9.2.3.1 для пробирок после инкубации по Э.2.2.6. показав
ших образование газа и/или помутнение после (24 ♦ 2) ч или после (48 ± 2) ч.
Допускаетсянопроводитьпересевнажидкуюподтверждающуюсредуприявномгазообразовании
нажидкихсредахнормалыюй концентрации, считаяпри этом этипосевыположипюльными.
9.2.4 Оценкарезультатов
Возможные случаи оценкирезультатовприведеныв приложенииА.
Для каждой навески продукта и/или его разведения подсчитывают число пробирок, в которыхобнару
жено образование газа (положительные пробирки) после (24 ± 2) ч и (если использовали) после (48 ± 2) ч.
9.2.5 Подсчет и выражение результатов
Подсчитывают наиболее вероятное число, исходя из числа положительных пробирок в каждой навес
ке продукта и/или его разведении. По
ГОСТ26670
определяют НВЧ колиформных бактерий в 1 г или 1см3
продукта.
9.3 Метод определения количества колиформных бактерий — подсчет колоний
9.3.1 Навеска и исходное разведение
Отбор навесок иприготовление исходногоразведения— поГОСТ26669.
1919