ГОСТ Р ИСО 10993.13-99
Приложение В
(справочное)
Идентификация и количественное определение продуктов деструкции полимерных материалов методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) может применяться для анализа целого ряда
продуктов деструкции в вытяжках из полимерных материалов медицинского назначения:
- при определении концентрации исходных мономеров в качестве метода, альтернативного газовой хро
матографии (ГХ). В ряде случаев (при высокой чувствительности детектирования) осуществление ВЭЖХ ока
зывается значительно проще, чем анализ ГХ равновесной паровой фазы:
- при определении остаточных количеств сравнительно высокомолекулярных исходных продуктов син
теза полимерных композиций для стоматологии, например олигоглицерилмстакрилатов, уретанметакрила-
тов, эфиров иэофгалсвой кислоты и т. п.;
- при определении концентраций компонентов резиновых смесей (ускорители вулканизации, антиокси
данты ит.д.). Метод нс требует трудоемкой подготовки пробы, включающей процессы экстракции, как. напри
мер. в случае использования тонкослойной хроматографии (ТСХ);
- при анализе различных биологических добавок к полимерным медицинским изделиям (например, ле
карственные средства, антимикробные агенты и т. и.).
Чувствительность определения, в зависимости от допустимых уровней концентрации анализируемых ве
ществ в вытяжках, должна составлять от десятых до тысячных долей миллиграмма на литр.
Для указанных целей может быть использована обрашеннофазоная ВЭЖХ с неподвижными фазами типа
октадецнлеилана (С 18). гексадецилсидана (С 16), нигрильной (CN). а также гель-проникающая ВЭЖХ с
неподвижными фазами, например диолыюй (ОН), имеющими размеры пор в соответствии с молекулярными
массами анализируемых соединений. Эти варианты ВЭЖХ дают возможность непосредственного ввода проб
водных вытяжек без предварительной подготовки.
Следует отмстить, что в последнее время появились сорбенты, например диабонл С 16Т. позволяющие
вводить в хроматограф пробы, содержащие высокомолекулярные вещества, без дополнительной обработки.
Полимерные продукты выходят с такой колонки, нс удерживаясь, низкомолекулярные разделяются в услови ях
обычной обращеннофазовой хроматографии.
Подвижными фазами могут быть смеси буферного раствора или воды (в случае анализа нейтральных
веществ) с органическими модификаторами, позволяющие работать при длинах волн детектирования вдиапа
зоне 200 —400 нм. В качестве буферного раствора, удовлетворяющего этим требованиям, можно использовать
0,01 —0.05 М фосфатно-аммиачный буферный раствор (ФАБ); обычно применяемые органические модифи
каторы — ацетонитрил и метанол соответствующей квалификации.
В качестве детектора используют спектрофотометры с перестраиваемой длиной волны и чувствительно
стью порядка 0.001 —0.002 ел. ОП / 1 мВ. Используемый при этом насос должен обеспечивать эффективное
демпфирование потока для сглаживания пульсаций, поскольку работа при указанных выше диапазонах чув
ствительности детектора возможна лишь при минимальном уровне шума.
Идентификация пиков на хроматограммах вытяжек, в большинстве случаев представляющих собой мно
гокомпонентные смеси, существенно облегчается при наличии спектрофотометра, обеспечивающего работу
вдвухволновом режиме. В этом случае для целей более надежной идентификации служат соотношения площа
дей (или высот) пиков на хроматограммах, полученных при детектировании при различных длинах волн (на
пример, 220 и 254 нм для соединений, содержащих ароматические структуры), помимо времен удерживания.
Хроматограф должен быть снабжен инжектором с дозирующей петлей (20 — 500 мкл) для обеспечения
хорошей воспроизводимости результатов. При этом вбольшинстве случаев применение внутреннего стандарта
нс является обязательным.
При работе по методу внешнего стандарта для катибровки хроматографичсското оборудования исполь
зуют растворы стандартных образцов, приготовленных из очищенных образцов (нс менее 90 % степени чисто
ты) с точно известным содержанием основного вещества.
Для количественных расчетов используют электронный интеграторлибо компьютерную программу сбора
и обработки хроматографических данных. В последнем случае используемый аналого-цифровой преобразова
тель должен обеспечивать минимальный уровень собственных шумов.
Ниже приведены основные параметры хроматографического анализа ряда химических соединений в вод
ных вытяжках из образцов изделий медицинского назначения с использованием УФ-сиектрофотомстра. Чув
ствительность детектора —0,002 ел. ОП / I мВ.
II