ГОСТ Р 54905—2012
Срок хранения при комнатной температуре — не более 1 мес.
4.3.2 Приготовление раствора натрия гидроокиси массовой долей 9,7 %
Растворяют 16,05 г натрия гидроокиси в 150 см
3
дистиллированной воды. Полученный раствор
охлаждают до комнатной температуры.
Срок хранения раствора при комнатной температуре — не более 6 мес.
4.3.3 Приготовление реактива 3,5-динитросалициловой кислоты (ДНС) массовой долей 1,0 %
В стакан вместимостью 1 дм
3
вносят 10,0 г ДНС, добавляют 400 см
3
дистиллированной воды и
перемешивают на магнитной мешалке в течение 25—30 мин при комнатной температуре. Затем при
постоянном перемешивании постепенно добавляют 150 см
3
раствора натрия гидроокиси (4.3.2). При
этом окраска раствора меняется от светло-желтой до ярко-желтой.
Стакан с полученным раствором помещают на водяную баню с температурой (47 ± 1) °С, посте-
пенно небольшими порциями добавляют 300 г калия-натрия виннокислого 4-водного и перемешивают
до полного растворения реактива.
Раствор охлаждают до комнатной температуры, переносят в мерную колбу вместимостью 1 дм
3
и
доводят объем до метки дистиллированной водой. Приготовленный реактив должен иметь ярко-желтое
окрашивание (без красного оттенка).
При необходимости (в случае образования осадка) раствор фильтруют через воронку со стеклян-
ным фильтром.
Срок хранения реактива в темной бутыли при комнатной температуре — не более 6 мес.
4.3.4 Приготовление субстрата — раствора
β
-глюкана массовой долей 0,5 %
В коническую колбу вместимостью 100 см
3
вносят 0,25 г
β
-глюкана, добавляют 3 см
3
этилового
спирта. К суспензии добавляют приблизительно 30 см
3
буферного раствора (4.3.1). Смесь нагревают в
водяной бане при температуре от 60 °С до 70 °С при энергичном перемешивании до полного раство-
рения
β
-глюкана. При этом образуется мутный раствор. Колбу с раствором охлаждают до комнатной
температуры, доводят буферным раствором (4.3.1) до 50 г (по массе) и тщательно перемешивают.
При необходимости раствор осветляют центрифугированием при 7000 мин
–1
в течение 10—15 мин или
фильтрованием через воронку со стеклянным фильтром.
Субстрат готовят перед проведением анализа.
4.3.5 Приготовление градуировочных растворов глюкозы
4.3.5.1 Приготовление основного градуировочного раствора глюкозы молярной (массовой) кон-
центрации 5 мкмоль/см
3
(900 мкг/ см
3
)
В мерную колбу вместимостью 100 см
3
помещают 90 мг безводной глюкозы, взвешенной с точ-
ностью до 0,2 мг, растворяют в небольшом количестве буферного раствора (4.3.1), доводят до метки
буферным раствором и тщательно перемешивают.
4.3.5.2 Приготовление рабочих градуировочных растворов глюкозы
Из основного градуировочного раствора глюкозы (4.3.5.1) готовят серию разведений в соответ-
ствии с таблицей 1.
Таблица 1 — Приготовление рабочих градуировочных растворов глюкозы различной концентрации
Объем градуировочного раствора
глюкозы молярной (массовой) концентрации
5 мкмоль/см
3
(900 мкг/см
3
), см
3
Объем буферного раствора
молярной концентрации
0,1 моль/дм
3
, см
3
Концентрация глюкозы
в рабочем растворе
4
массовая, мкг/см
3
молярная, мкмоль/см
3
1 9 90 0,5
2 8 180 1,0
3 7 270 1,5
4 6 360 2,0
5 5 450 2,5
6 4 540 3,0
7 3 630 3,5
8 2 720 4,0
9 1 810 4,5
10 0 900 5,0