ГОСТ Р 54637—2011
6
2D2
этиловый ректификованный. Для расчета массовой концентрации раствора витамина D (С , мкг/см
3
)
используют уравнение:
A
265
10
6
D
2
100 475
C=
,
(1)
где A
265
— значение оптической плотности рабочего раствора витамина D
2
при 265 нм;
475 — значение оптической плотности раствора витамина D
2
массовой концентрации 1 г в 100 см
3
при 265 нм в спирте этиловом при толщине поглощающего слоя 1 см ();
10
6
— коэффициент пересчета граммов в микрограммы;
100 — коэффициент пересчета на 1 см
3
.
3
3
3
3D3
8.1.2.2 1 см
3
исходного раствора витамина D , приготовленного по 8.1.1.2, с помощью пипетки
переносят в мерную колбу объемом 100 см
3
и доводят до метки спиртом этиловым ректификованным.
Раствор готовят непосредственно перед проведением анализа. Массовая концентрация рабочего рас-
твора витамина D составляет 10 мкг/см
3
.
Измерение оптической плотности стандартного раствора витамина D проводят в кварцевой кю-
вете с толщиной поглощающего слоя 1 см при 265 нм, используя в качестве раствора сравнения спирт
этиловый ректификованный. Для расчета массовой концентрации раствора витамина D (С, мкг/см
3
)
используют уравнение:
C
D
3
=
A
265
10
6
,
100 485
(2)
где A
265
— значение оптической плотности рабочего раствора витамина D
3
при 265 нм;
485 — значение оптической плотности раствора витамина D
3
массовой концентрации 1 г в 100 см
3
при 265 нм в спирте этиловом при толщине поглощающего слоя 1 см ();
10
6
— коэффициент пересчета граммов в микрограммы;
100 — коэффициент пересчета на 1 см
3
.
2
2
2
23
2
3
23
3
3
3
3
8.1.2.3 Для приготовления рабочего раствора внутреннего стандарта витамина D 10 см
3
стан-
дартного раствора витамина D по 8.1.1.1 с помощью пипетки помещают в мерную колбу объемом
100 см
3
и доводят до метки спиртом этиловым ректификованным. Раствор готовят непосредственно
перед использованием. Массовая концентрация рабочего раствора витамина D составляет 1 мкг/см
3
.
8.1.2.4 Для приготовления рабочего раствора смеси витаминов D и D , необходимого для про-
ведения полупрепаративной НФ ВЭЖХ, помещают 5 см
3
рабочего раствора витамина D по 8.1.2.1 и
5 см
3
рабочего раствора витамина D по 8.1.2.2 в колбу роторного испарителя. Растворитель тщательно
упаривают на водяной бане при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток перерастворяют в 50 см
3
н-гексана или подвижной фазы, используемой для проведения полупрепаративной НФ ВЭЖХ. Массо-
вая концентрация витамина D (D ) в растворе составляет 1 мкг/см
3
.
8.1.2.5 Из исходных растворов готовят не менее четырех рабочих растворов витамина D в диа-
пазоне концентраций 0,1—10,0 мкг/см
3
, используемых для построения градуировочного графика по 8.4.
Для этого 1,0 см
3
и 10,0 см
3
рабочего раствора витамина D по 8.1.2.2 с помощью пипетки помещают в
мерную колбу на 100 см
3
и растворы доводят до метки спиртом этиловым абсолютным (массовая
концентрация полученных растворов витамина D составляет 0,1 мкг/см
3
и 1,0 мкг/см
3
), а также 0,5 см
3
и
1,0 см
3
исходного раствора витамина D по 8.1.1.2 помещают в мерную колбу на 100 см
3
и растворы
доводят до метки спиртом этиловым абсолютным (массовая концентрация полученных растворов ви-
тамина D
3
составляет 5,0 мкг/см
3
и 10,0 мкг/см
3
).
8.2 Отбор и подготовка проб
8.2.1 Отбор проб проводят по ГОСТ 13496.0, ГОСТ 26809.1, ГОСТ Р 52062, ГОСТ Р 52179.
8.2.2 Крупные частицы средней пробы, выделенной методом квартования из лабораторной про-
бы, измельчают с использованием подходящего оборудования (например, лабораторной мельницы) до
такого состояния, чтобы весь продукт проходил через сито с отверстиями диаметром 1 мм. Размолотую
пробу тщательно перемешивают.