ГОСТ Р 54085—2010
Допускается объединение проб для анализа в том случае, если анализируется больше одной про-
бы от продукта и когда объединенная проба не влияет на результат испытания. (Например, необходимо
проанализировать 10 проб по 25 г. Объединяют 10 проб продукта (общая масса составит 250 г) и при-
бавляют 2,25 дм
3
неселективной среды).
8.1.2 Специфика приготовления исходного разведения для некоторых продуктов
Указанную специфику приготовления применяют только для выявления бактерий рода Shigella.
8.1.2.1 Какао и какаосодержащие продукты (какао больше, чем 20 %)
Добавляют в забуференную пептонную воду (по 5.2.1) 100 г обезжиренного молочного порошка
или 50 г казеина (кислый казеин не используют). Казеин и молочный порошок добавляют при приготов-
лении забуференной пептонной воды до стерилизации.
8.1.2.2 Высококислотные пищевые продукты
При неселективном обогащении должна быть гарантия того, что рН посевов будет не менее 5,0.
рН высококислотных пищевых продуктов стабилизируют путем использования забуференной пеп-
тонной воды двойной концентрации.
Допускается при высеве жидких высококислотных пищевых продуктов, для предотвращения сни-
жения рН сред на 0,5 и более, рН продукта перед посевом доводить до (7,0 ± 0,2).
При высеве твердых высококислотных пищевых продуктов допускается доводить рН до (7,0 ± 0,2)
в посевах.
Доведение рН продукта проводят с соблюдением правил асептики с помощью стерильных раство-
ров гидроокиси натрия и соляной кислоты, приготовленных по ГОСТ 10444.1. Количество добавляемых
растворов устанавливают опытным путем.
8.2 Неселективное обогащение
Посев в забуференную пептонную воду по 8.1.1 инкубируют при температуре (37 ± 1)
°
С в течение
(18 ± 2) ч.
8.3 Селективное обогащение
Культуры, полученные после инкубирования по 8.2, пересевают в среду для селективного обо-
гащения. Для этого по 1 см
3
культуральной жидкости пересевают в 10 см
3
бульона для бактерий рода
Shigella.
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1)
°
С в течение (24 ± 2) ч.
Если от одного пищевого продукта проведен высев нескольких проб продукта для анализа (каж-
дой пробы отдельно) для выявления бактерий рода Shigella, то допускается из каждого посева по 8.2
проводить пересев в один флакон с бульоном для шигелл. При этом количество селективной среды во
флаконе должно быть увеличено по сравнению с 10 см
3
во столько раз, из скольких посевов проводят
пересев.
Свежие продукты, не содержащие сублетально поврежденных микроорганизмов, подвергнутых
каким-либо воздействиям, например сушке, заморозке и т.д., допускается высевать непосредственно в
селективную среду, минуя этап неселективного обогащения. Объемы высеваемого продукта и среды
должны быть в соотношении не менее 1:10.
8.4 Выделение чистой культуры
5
8.4.1 Культуры после 24 ч инкубирования на селективной среде пересевают так, чтобы получить
хорошо изолированные колонии на ксилоза лизин дезоксихолатный агар (XLD агар) и на одну из агари-
зованных сред: гектоеновый энтероагар, сальмонелла-шигелла агар, висмут-сульфит агар, среду Пло-
скирева, среду Эндо, среду Левина или дезоксихолатный цитратный агар.
При отсутствии чашек большого размера по 6.14 используют для пересева петлей две чашки
нормального размера по 6.14 (одну за другой). Пересев проводят в соответствии с требованиями при-
ложения В.
На ксилозализин дезоксихолатном агаре проводят учет ферментации лактозы, сахарозы, ксило-
зы, декарбоксилирование лизина, образование сероводорода.
Бактерии рода Shigella не ферментируют лактозу, сахарозу, ксилозу, не декарбоксилируют лизин
и не образуют сероводород.
На гектоеновом энтероагаре проводят учет ферментации лактозы, сахарозы, салицина и образо-
вание сероводорода.
Бактерии рода Shigella не ферментируют салицин.