ГОСТ Р 54634―2011
Таблица 2 — Рекомендуемые соотношения испытуемого материала и реактивов
Массовая доля
витамина Е, млн
–1
Навеска испытуемого
материала, г
Объем
этанола, см
3
Объем 50%-ного
раствора КОН, см
3
От 5 до 100 включ.
10—20
150
40
Св. 100 до 1000 включ.
5—10
100
15
Св. 1000 до 5000 включ.
1—5
50
3
Если после охлаждения на поверхности смеси остается слой масла или жира, то объем добавлен-
ного раствора КОН и время щелочного гидролиза увеличивают.
После окончания гидролиза содержимое колбы быстро охлаждают до (20 ± 5) °С и количественно
переносят в делительную воронку. Колбу ополаскивают водой, объем которой равен объему добавлен-
ного этилового спирта, и воду сливают в ту же воронку. Токоферолы экстрагируют диэтиловым (или
петролейным) эфиром, этилацетатом, н-гексаном, н-гексаном с добавкой диэтилового (или петролей-
ного) эфира в объемном соотношении 1:1 в течение 2 мин. Если в качестве экстрагента используется н-
гексан или н-гексан с добавкой диэтилового (или петролейного) эфира, то для учета возможной не-
полной экстракции токоферолов следует применять метод добавок стандартов.
Экстракцию повторяют три-четыре раза порциями экстрагента 50—100 см
3
. Объединенный экс-
тракт отмывают от щелочи три-четыре раза порциями воды 50—150 см
3
до исчезновения щелочной
реакции промывных вод (по универсальной индикаторной бумаге).
Для удаления воды экстракт фильтруют через фильтр с 2—5 г безводного сульфата натрия. Далее
экстракт упаривают досуха, используя роторный испаритель, и перерастворяют в н-гексане. При необ-
ходимости раствор можно использовать для последующего разведения.
8.2.6 Раствор, полученный по 8.2.3 (8.2.4, 8.2.5), анализируют методом НФ ВЭЖХ. Для анализа
методом ОФ ВЭЖХ аликвоту гексанового раствора упаривают в токе азота и сухой остаток перерас-
творяют в элюенте для ОФ ВЭЖХ. Навеску испытуемого материала и объем растворителя подбирают
таким образом, чтобы массовая концентрация токоферолов в анализируемом растворе находилась в
диапазоне, соответствующем диапазону массовых концентраций рабочих растворов стандартных ве-
ществ, используемых при построении градуировочного графика по 8.4.
8.3 Подготовка жидкостного хроматографа
Подготовку жидкостного хроматографа к работе осуществляют в соответствии с инструкцией по
эксплуатации оборудования. Перед началом работы колонку промывают элюентом.
8.4 Построение градуировочной зависимости
гр
i
S
Процедуры построения градуировочной зависимости выполняют в соответствии с руководством
по эксплуатации оборудования и руководством пользователя по программному обеспечению. Прово-
дят хроматографический анализ не менее четырех рабочих растворов витамина Е, приготовленных
по 8.1.2.
Градуировочный график строят в координатах «аналитический сигнал» — «массовая концентра-
ция витамина в градуировочном растворе, мкг/см
3
». Для каждого анализируемого раствора проводят
два параллельных измерения и находят среднее арифметическое значение. Различие между изме-
ренными значениями аналитических сигналов и времени удерживания не должно превышать 5 % от
средних значений. Линейные участки градуировочного графика должны соответствовать всему диа-
пазону определяемых концентраций витамина Е. Коэффициент градуировочного графика [k , мкг/см
3
/
(mAU · c) или мкг/см
3
/(AU · c)] определяют как среднеарифметическое значение коэффициентов k,
вычисляемых по формуле
k
i
=
C
i
,
(2)
i
7
i
i
где С — массовая концентрация стандартных веществ в i-м градуировочном растворе, мкг/см
3
;
S — площадь аналитического сигнала при анализе i-го градуировочного раствора, mAU · c или
AU · c.
Правильность построения градуировочной зависимости контролируется величиной достоверной
аппроксимации
R
2
≥
0,997.