ГОСТ 29311-92 С. 8
В контрольные пробирки наливают воду и остальные реактивы. Выдерживают 1 мин и коло-
риметрируют при длине волны 670 нм (красный светофильтр) в кювете с толщиной поглощающего
слоя 3 мм.
4.6.3.3. Проведение испытания
Из раствора минерализата, полученного по п. 4.2.1.3, отбирают 2,5 см3, переносят в пробирку,
доба&тяют 2 см3 раствора молибдата натрия, тщательно перемешивают, добавляют 0,5 см3хлорида
олова и снова перемешивают.
4.6.3.4. Обработка результатов
Массу фосфора нуклеотидов (А-,) в процентах, равную количеству азота нуклеотидов, вычис
ляют по формуле
X,
1И, •100
ys 1000’
где /мj —количество фосфора, определенное по кривой, мг/%;
Vi —объем гидролизата, используемый для анализа, см’;
100 —коэффициент пересчета на 100 см3гидролизата в проценты:
1000 —коэффициент пересчета из миллиграммов в граммы.
Масса азота аминокислот (А*) в процентах равна
ах
=
а
-
а
6 -
а
7.
4.7. Рост тссг-штаммов микроорганизмов
4.7.1. Аппаратура, материалы и реактивы
Термостат с температурой нагрева (37 ± 1) *С.
Фотоэлектроколориметр.
Автоклав.
Весы технические.
pH-метр.
Пипетки вместимостью 1, 2, 10 см3 по ГОСТ 29227 и пипетки пастеровские стерильные.
Бюретки вместимостью 25 или 50 см3по ГОСТ 29251.
Пробирки стеклянные по ГОСТ 1770 с ватно-марлевыми пробками, стерильные.
Воронки для фильтрования по ГОСТ 25336.
Фильтры бумажные.
Чашки Петри, стерильные.
Петля платиновая.
МПБ (1:1) по ГОСТ 20730 и МПА в пробирках с ватно-марлевыми пробками, стерильные.
Пептон сухой ферментативный по ГОСТ 13805.
Агар микробиологический по ГОСТ 17206.
Натрия хлорид по ГОСТ 4233.
Культуры тест-штаммов микроорганизмов: Staphylococcus aureus штамм Лоссманов, Escherichia
coli шт. 675, Streptococcus faecalis 6783.
4.7.2. Подготовка к испытанию
4.7.2.1. Приготовление питательных сред
Из испытуемого гидролизата готовят питательную среду с содержанием аминного азота 0.15—
0,18 %, полипептидов —не менее 1.5 %, pH 7.4—7,6.
С этой целью гидролизат разводят по аминному азоту из расчета его содержания в разведении
0.15 %. Добавляют, в случае необходимости, сухой ферментативный пептон до получения в среде
указанного минимума полипептидов, а также 0.5 % хлорида натрия. Устанавливают pH 7,6—7,8
добавлением 10 %-ного раствора гз<дроксида натрия или соляной кислоты, кипятят 5—10
мин, охлаждают, доводят водой до первоначального объема и фильтруют. Если в процессе
обработки pH среды сдвигается, его вновьдоводятдо указанных величин, после чего нагревают до
кипения и снова фильтруют. Фильтрат разливают в пробирки по 8 см3, закрывают ватно-
марлевыми пробками и пергаментными колпачками и стерилизуют в автоклаве в течение 30 мин
при 1,5 кгс/см3.
Для приготовления агаровой среды в полученную после внесения ингредиентов жидкую пита
тельную среду добавляют 2 % микробиологического агара по ГОСТ 17206. Устанавливают pH 7,6—7,8.
Среду кипятят до полного растворения агара, фильтруют и разливают в пробирки по 5 см3, в