С. 7 ГОСТ 29311-92
I06—коэффициент пересчета микрограммов и граммы;
100 —коэффициент пересчета в проценты.
Массовую долю триптофана (А’,) в процентах рассчитывают по формуле
_ К,-100
41000
’
где Vx - объем 1%-ного раствора хлорамина, израсходованный на титрование: см3:
1000 —коэффициент пересчета миллиграммов в граммы;
100 —коэффициент пересчета в проценты.
Общее содержание аминокислот (А"}) определяют как сумму Х3и Хх.
4.6.Определение азота аминокислот
Сущность метода заключается в расчете азота аминокислот как разности результатов содержа
ния общего азота, азота полипептидов и нуклеотидов.
4.6.1. Определение азота полипептидов
Массу азота полипептидов (Л^,) в процентах вычисляют по формуле
где X, — количество полипептидов, %;
6,25 —коэффициент пересчета.
4.6.2. Определение азота нуклеотидов
Азот нуклеотидов определяют как эквивалент фосфору нуклеотидов.
4.6.3. Определение фосфора нуклеотидов
Сущность метода заключается в определении интенсивности окраски молибденовой сини с
восстановлением хлористым оловом.
4.6.3.1. Аппаратура и реактивы
Фотоэлектроколориметр.
Кислота серная по ГОСТ 4204 концентрированная, концентрации с (’/: H,S04) = 2,5 моль/дм3.
Натрий моднбденовокислый двуводный по ГОСТ 10931.
Олово хлористое, х. ч. или ч. д. а. по ГОСТ 36.
Кислота соляная по ГОСТ 3118, концентрированная.
Калий фосфорнокислый однозамешенный по ГОСТ 4198.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Вода бидистиллировапная.
4.6.3.2. Подготовка к испытанию
Приготовление серной кислоты концентрации с (’/2 H,S04) = 2,5 моль/дм3. Берут 69.6 дм3
серной кислоты плотностью 1.84 г/см3 и разводят в бндистиллпрованной воде в мерной колбе
вместимостью 1дм3.
Приготовление молибдата натрия
Навеску молибдата натрия 18.75 г растворяют в 1 дм3 серной кислоты концентрации
с (*/2 H:S04) = 2,5 моль/дм3. Раствор хранят в темной посуде с притертой пробкой.
Приготовление раствора хлорида олова.
10 г хлорида олова растворяют в 25 см3концентрированной соляной кислоты при нагревании.
Хранят в темной посуде с притертой пробкой. Перед употреблением 0,5 см3 раствора разводят в
100 см’ бидистиллироваипой воды.
Приготовление стандартного раствора фосфора
Калий фосфорнокислый однозамешенный перекристаллизованный высушивают в эксикаторе
над серной концентрированной кислотой в течение 6—7 дней. Навеску фосфата калия 0.4394 г
разводят в 1дм3дистиллированной воды в мерной каабе. I дм’ раствора содержит 0,1 мг
фосфора.
Построение калибровочной кривой
Для построения калибровочной кривой в мерные колбы вместимостью 100см3берут стандарт
ный раствор в количестве 1, 2, 3, 4, 5, 6. 7, 8 см3и доводят до метки бидистиллироваипой водой.
В две пробирки наливают по 2,5 см5 испытуемого раствора, добавляют по 2 см3 раствора
молибдата натрия, тщательно перемешивают, добавляют 0,5 см3 раствора хлорида олова и снова
перемешивают.