ГОСТ 29311-92 С. 4
4. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ
4.1. Определение внешнего вида и цвета
Внешний вид: наличие механической примеси, плесени, хлопьев, осадка устанавливают, про
сматривая флаконы с гидролизатом в проходящем свете, для чего флаконы встряхивают и перево
рачивают пробками вниз.
Цвет определяют визуально на белом фоне.
4.2. Определение общего азота —по ГОСТ 20730 или по методу Несслера.
4.2.1. Определение общего азота по методу Несслера
Сущность метода заключается п том, что получаемый в результате минерализации вещества
сульфат аммония расщепляется в щелочной среде до аммиака. При pH 12 аммиак вступает в реакцию
с реактивом Несслера. При этом образуется комплексное соединение ртути желто-оранжевого цвета,
интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации аммиака и может быть измерена
колориметрически.
4.2.1.1. Аппаратура и реактивы
Фотоэлектроколориметр.
Пипетки по ГОСТ 29227.
Натрия гидроксид по ГОСТ 4328, 10 %-ный раствор.
Реактив Несслера по ТУ 6-09—20.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
4.2.1.2. Подготовка к испытанию
Построение калибровочной кривой
Готовят стандартный раствор сернокислого аммония, 1см3 которого содержит 0.1 мкг азота:
0.4716 г аммония сернокислого ос. ч. или х. ч. растворяют в 1дм3дистиллированной воды. Вмерные
колбы вместимостью 50 см3 вносят 0,5—1,0—1.5—2,0—2,5—3,0 см3 стандартного раствора, что со
ответствует 0,1—0.2—0,3—0,4—0.5—0.6 миллиграмм-процента азота. Добавляютдо 3Д объема колбы
дистиллированную воду, вносят 2,5 см3реактива Несслера, доводят водой до метки и перемешивают.
Измеряют на фотоэлектроколориметре при 440 нм (синий светофильтр) в кюветах с толщиной
поглощающего свет слоя I см против кюветы с контрольным раствором (9,5 см3воды плюс 0.5 см3
реактива Несслера).
4.2.1.3. Проведение испытания
Для минерализации в колбу Кьельдаля берут 0.5 см3предварительно профильтрованного гид
ролизата и 1,0 см3серной кислоты. Минерализат переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3,
многократно обмывая колбу Кьельдаля. Раствор доводят водой до метки и тщательно перемешивают.
В пробирку отбирают 0,5 см3раствора, добааляют 0,1 см3 гидроксида натрия, перемешивают,
добаатяют 8,9 см3воды и 0.5 см ’ реактива Несслера.
В качестве оптического контроля используют образец, состоящий из 9.5 см3 воды и 0.5 см3
реактива Несслера.
Пробы тщательно перемешивают и через 2 мин колорнметрируют при 440 нм (синий свето
фильтр) в кюветах с толщиной поглощающего свет слоя 1см.
4.2.1.4. Обработка результатов
Массу общего азота (А) в процентах вычисляют по формуле
от 100 10
лг г, •юии ’
где т —масса азота, определенная по стандартной кривой, мг/%;
100 —коэффициент пересчета для первого разведения;
10 —коэффициент пересчета для второго разведения;
V— объем гидролизата, используемый для определения, см3;
У, — объем 1-го разведения, используемый для реакции, см3;
1000 —коэффициент пересчета в грамм-проценты.
4.3. Определение аминного азота
Сущность метода заключается в связывании аминогруппы аминокислот формальдегидом и
оттитровывании диссоциированной карбоксильной группы раствором щелочи.
4.3.1.Аппаратура, материалы и реактивы
pH-метр: нономер ЭВ-74 или другой прибор того же назначения.