ГОСТ Р 70296—2022
- бокс ламинарный с вертикальным потоком воздуха класса защиты II типа А со встроенной
бактерицидной лампой для выделения ДНК;
- ПЦР-бокс со встроенной бактерицидной лампой;
- микроцентрифуга-встряхиватель (вортекс) с ротором для микропробирок, скоростью вращения
не менее 2400 об/мин и максимальным ускорением до 700 д;
- микроцентрифуга с угловым ротором со скоростью вращения до 14 800 об/мин, максимальным
ускорением 21 100 д;
- отсасыватель вакуумный медицинский с колбой-ловушкой;
- холодильник бытовой по ГОСТ 26678, обеспечивающий поддержание температуры от 2 °С до
8 °С, с морозильной камерой, обеспечивающей поддержание температуры не выше минус 16 °С.
5.2 Для проведения испытаний применяют следующие реактивы:
- набор реагентов для выделения ДНК сорбционным методом1);
- вода деионизованная для молекулярной биологии класса чистоты I, свободная от РНКаз, ДНКаз;
- растворы олигонуклеотидов и зондов, меченых флуоресцентными красителями, с молярной
концентрацией 100 мкмоль/дм3, позволяющие амплифицировать соответствующие фрагменты генов
млекопитающих и птиц;
- смесь дНТФ (концентрация каждого нуклеотида 25 мМ или концентрация каждого нуклеотида
10 мМ);
- Taq ДНК-полимераза с ингибирующими активность фермента антителами2);
- ПЦР-буфер для Taq ДНК-полимеразы;
- ТЕ-буфер;
- раствор плазмиднойДНК, содержащей клонированный фрагментгена Rarresl, видоспецифичный
для кур3);
- раствор плазмидной ДНК, содержащей клонированный фрагмент гена RPL6, видоспецифичный
для быка домашнего;
- раствор плазмидной ДНК, содержащей клонированный фрагмент гена Рор1, видоспецифичный
для свиньи;
- раствор плазмидной ДНК, содержащей клонированный фрагмент гена RPS6, видоспецифичный
для лошади;
- раствор плазмидной ДНК, содержащей клонированный фрагмент геномного элемента VE1800,
консервативного у птиц и млекопитающих;
- дезинфицирующее средство для обработки рабочего места по [1];
- спирт этиловый 96 % ректификованный по ГОСТ 5962;
- вода дистиллированная по ГОСТ Р 58144.
5.3 Для проведения испытаний применяют следующие материалы:
- пробирки одноразовые полипропиленовые плотно закрывающиеся, вместимостью 0,6 и 1,5 см3;
- тонкостенные пробирки для ПЦР с плоской крышкой вместимостью 0,2 см3;
- наконечники одноразовые универсальные с фильтром и без фильтра для автоматических
дозаторов с варьируемыми объемами доз;
- штативы пластиковые для пробирок и наконечников разного объема;
- перчатки одноразовые латексные или нитриловые без пудры;
- пластиковые контейнеры для сбора и дезинфицирующей обработки расходных материалов,
перчаток и ветоши, емкости для сброса наконечников.
5.4 Допускается использование других средств измерений с метрологическими характеристиками,
а также оборудования, материалов и реактивов с техническими характеристиками не хуже указанных.
5.5 Допускается использование готовых наборов реагентов или тест-систем для полуколиче-
ственной оценки содержания ДНК методом ПЦР в режиме реального времени, основанных на сравне нии
количества ДНК целевого животного и ДНК птиц и млекопитающих.
1) Примером можетслужить набор «Сорб-ГМО-Б» (Синтол, Россия), или «ДНК-сорб-С-М» (ФБУН ЦНИИ Эпи
демиологии, Россия) или «ДНК-ПЛАНТ-ФАКТОР» (ВЕТ ФАКТОР, Россия). Данная информация не является рекла
мой и рекомендована для удобства пользователей настоящего стандарта.
2) Примером может служить «SynTaq ДНК-полимераза» (Синтол, Россия) Данная информация не является
рекламой и рекомендована для удобства пользователей настоящего стандарта.
3) Примером может служить типовой плазмидный вектор с клонированным фрагментом соответствующего
гена, произведенный в биотехнологической компании.
4