ГОСТ Р 70296—2022
Окончание таблицы 6
Наименование
Роль
Нуклеотидная последовательность
Положение
VE1800-R
Обратный праймер
AACTTGCACACTAATTCCCTTTG
52219776
Примечание— Указаны позиции первого нуклеотида соответствующего олигонуклеотида в
последовательности генома лошади (Equus caballus) с номером NC_009152.3 вбазеданных GenBank.
10.6 Приготовление мастермикса «ПЦР-смеси-1»
10.6.1Для амплификации фрагментов Rarresl, RPL6, Horse и VE1800 готовят соответствующие
мастермиксы «ПЦР-смесь-1». Вотдельных предварительно промаркированных одноразовых пробирках
вместимостью 1,5 см3смешивают следующие реагенты в соответствии с таблицей 7.
Таблица 7 — Приготовление мастермиксов «ПЦР-смесь-1-Rarresl» «ПЦР-смесь-1-RPL6»
и «ПЦР-смесь-1-Horse»
РеагентыОбъем на 100 реакций, мм3
Вода деионизованная
950
Праймеры на видоспецифичный ген,
100 мкмоль/дм3
прямой праймер F
6
обратный праймер R
6
Зонд на видоспецифичный ген, 100 мкмоль/дм3
3
Праймеры на элемент VE1800,
100 мкмоль/дм3
прямой праймер F
6
обратный праймер R
6
Зонд на элемент VE1800, 100 мкмоль/дм3
3
Смесь дНТФ 25 ммоль/дм320
Общий объем1000
Примечание — При использовании смеси дНТФ сдругой концентрацией, ее объем на реакцию и объем
деионизованной воды меняется пропорционально.
10.6.2Для амплификации фрагментов Рор1 и VE1800 готовят мастермикс «ПЦР-смесь-1». В от
дельной предварительно промаркированной одноразовой пробирке вместимостью 1,5 см3смешивают
следующие реагенты в соответствии с таблицей 8.
Таблица 8 — Приготовление мастермикса «ПЦР-смесь-1-Рор1»
РеагентыОбъем на 100 реакций, мм3
Вода деионизованная
935
Праймеры на ген Рор1, 100 мкмоль/дм3
прямой праймер F12
обратный праймер R12
Зонд на ген Рор1, 100 мкмоль/дм3
6
Праймеры на элемент VE1800, 100 мкмоль/дм3
прямой праймер F
6
обратный праймер R
6
Зонд на элемент VE1800, 100 мкмоль/дм3
3
8