ГОСТ 30712-2001
5.4.4 Исследуемый объем пробы выливают в воронку и нажатием кнопки включают насос. При
отсутствии мерных уровней в воронке пробы объемом 100см’ и более отбирают стерильными цилинд
рами, а объемом 10см1- стерильными пипетками.
5.4.5 Но окончании фильтрации пробы фильтр промывают 2—3 см3стерильной питьевой воды
для удаления остаточных следов кислоты и консерванта. После прохождения жидкости через фильтр
колбу держат под вакуумом в течение 5—7 с (для полного удаления следов жидкости) и насос
отключают.
Снимают воронку и с помощью фламбированпогопинцета осторожно снимаютфильтр вдоль его
кромки.
Открывают чашку Петри с питательной средой и опускают, не переворачивая, на нее фильтр.
Накладывать фильтр следует так. чтобы между ним и поверхностью питательной среды не образовы
вались пузырьки воздуха.Для этого противоположный край фильтра (напротив пинцета) должен лечь
на поверхностьсреды, а затем постепенно накладывают весь фильтр «накатом» на среду.
Поверхность фильтра с осевшими на нее микроорганизмами должнабытьобращена вверх. Чашку
закрывают и на дне чашки под каждым фильтром делают надписи с указанием номера профильтро
ванной пробы. На одну чашку можно поместить взависимости от диаметра фильтра и чашки Петри от
I до 4 фильтров так, чтобы фильтры не соприкасались.
5.4.6 Перед фильтрацией следующей пробы столик и воронку прибора тщательно фламбируют.
Кроме фламбирования прибора можно перед следующей пробой проводить кипячение его в
кастрюле с питьевой водой, которая устанавливается недалеко от рабочего места. Вода должна быть
заранее доведена до кипения и полностью покрывать фильтровальный прибор. Кипячение проподятв
течение 1—2 мин. вынимают стерильный прибор фламбнрованными щипцами. Фильтровальный при
бор в собранном виде можно стерилизовать в автоклаве при (121 ± I) "С в течение 20 —30 мин.
6 Методы анализа
6.1 Определение количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорга
низмов
Метод основан на высеве продукта или разведения навески продукта в агаризованную питатель
нуюсреду. инкубировании посевов, подсчете всех выросших видимых колоний.
6.1.1 Проведение испытаний
6.1.1.1 Из навески продукта, отобранной по ГОСТ 26668. готовят исходный и ряд десятикрат
ных разведений по ГОСТ 26669 так, чтобы можно было определить в продукте предполагаемое коли
чество микроорганизмов или количество, указанное в нормативном документе на продукт.
6.1.1.2 При определении количества микроорганизмов посевом в агаризоваиные питательные
среды из продукта и (или) из каждого соответствующего разведения по 1см3 высевают в две парал
лельные чашки Петри. Посевы заливают расплавленной иохлажденной до 45 —48 “С одной из агаризо-
ванных сред по 5.3.1. Посевы проводят по ГОСТ 26670 (4.1).
6.1.1.3 Посевы инкубируют при температуре (30 ± I) *С в течение (72 ± 3) ч. Чашки Петри с
посевами распределяют втермостате таким образом, чтобы расстояние междустопками чашек и стен
ками термостата было не менее 3 см.
6.1.2 Обработка результатов
6.1.2.1 Количество выросших колоний подсчитывают на каждой чашке Петри, поместив ее вверх
дном на темном фоне, пользуясь лупой с увеличением в 4—10’. Каждую подсчитанную колонию
отмечают на дне чашки чернилами. Для подсчета отбирают чашки, на которых выросло от 15до 300
колоний.
6.1.2.2 При большом количестве колоний и равномерном их распределении дно чашки Петри
делят на 4 и более одинаковых секторов, подсчитывают число колоний на 2 - 3 секторах (но не менее
чем наповерхности чашки), находят среднеарифметическое значение числа колоний и умножают
на общее количество секторов всей чашки. Таким образом находят общее число колоний, выросших на
одной чашке.
Подсчитывают колонии микроорганизмов в каждом из параллельных посевов одного разведения.
По результатам подсчета вычисляют среднеарифметическое значение числа колоний в посевах одного
разведения.
Если имеются колонии, выросшие в последующих разведениях, то подсчитывают количество
микроорганизмов в продукте по результатам подсчета колоний в каждом из этих разведений раздельно
и вычисляют среднеарифметическое значение числа колоний.
6
206