ГОСТ 30712-2001
натрия гидроокись по ГОСТ 4328;
кислоту соляную по ГОСТ 3118;
кристаллический фиолетовый:
фуксин основной.
Допускается использование других средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов,
материалов, по техническим характеристикам не уступающих указанным выше.
5Подготовка к проведению анализов
5.1 Подготовка посуды
5.1.1.Новую посуду, предназначенную для микробиологических работ, кипятят в подкисленной
воде (раствор соляной кислоты объемной долей 1-2
%)
в течение 15 мин, затем ополаскивают
дистиллированной водой до полного удаления следов моющего раствора и высушивают в сушильном
шкафу.
5.1.2 Пробирки, колбы, бутылки закрывают ватно-марлевыми пробками, покрывают колпачком
так, чтобы исключить загрязнение после стерилизации в процессе работы и хранения. Пипетки со
вставленными тампонами из ваты упаковывают в металлические пенаты или заворачивают в бумагу.
Бактериологические чашки в закрытом виде уклатывают в металлические пенаты или заворачивают в
бумагу. Бумага, используемая для обертывания лабораторной посуды, не должна разрушаться при
стерилизации. Режимы стерилизации посуды — по ГОСТ 26668.
5.1.3 Стерильную посуду хранят в плотно закрывающихся шкафах или ящиках с крышками.
5.1.4 Посудус питательными средами после подсчета на них колоний микроорганизмовобеззара
живают перед мойкой путем стерилизации в автоклаве при (121 ± I) ’С в течение 30 мин или
кипячением в течение 1ч.
5.2 Приготовление реактивов и растворов
5.2.1 Реактивы для окраски по Грамму (модификация Г.Г1. Калины) —по ГОСТ 10444.1.
Приготовление реактива I
В 100 см}%
%-го
ректификованного спирта по ГОСТ 5962 растворяют 0.5 г кристаллического
фиолетового.
Приготовление реактива 2
К 96 см3 спиртового раствора йодистого калия массовой концентрации 5 г/дм’добавляют 2 см3
спиртового раствора основного фуксина массовой концентрации 50 г/дм’ и 2 см’ спиртового раствора
йода массовой концентрации 50 г/дм3.
Йодистый калий растворяют в спирте на водяной бане при температуре (45 ± 5) *С при постоян
ном помешивании.
5.2.2 Раствор гидроокиси натрия концентрации 100 г/дм3по ГОСТ 10444.1 (4.17). Готовый
раствор стерилизуют при (120 ± 1) *С в течение 20 мин.
Раствор применяется для подщелачивания питательных сред.
5.2.3 Спиртовой раствор основного фуксина массовой концентрации 5 г/дм3 по ГОСТ 10444.1
(4.25).
Применяютдля повышения дифференцирующих свойств среды Эндо.
5.2.4 Приготовление 70
%-го
раствора этилового спирта.
Для приготовления 70 %-го раствора этилового спирта необходимо к 70см !96
%-го
ректифико
ванного этилового спирта добавить 26 см3дистиллированной волы.
Применяют для асептической обработки тары при отборе пробдля анализа.
5.2.5 Приготовление стерильной воды
Питьевую воду разливают в колбы или пробирки и стерилизуют в автоклаве при (121 ± 1) *С в
течение 30 мин.
5.2.6 Сроки хранения реактивов и растворов не более месяца.
5.3 Приготовление питательных сред
5.3.1 Среда из сухого питательного агара
Среду готовят по прописи
на
этикетке или
используют
мясо-пептонный
агар,
приготовленный
по ГОСТ 10444.1 (5.12).
Применяютдля определения мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорга
низмов.
5.3.2 Среда Кесслер с лактозой
Среду готовят по прописи на этикетке. При приготовлении среды в пробирки шли колбы помеща
ют поплавки. Для приготовления среды двойной концентрации навеску среды увеличивают в 2раза.
4204