ГОСТ 30712-2001
Допускается приготовление среды из отдельных ингредиентов по ГОСТ 30518 (4.2.4).
Селективную среду применяют для накопления бактерий группы кишечных палочек.
5.3.3 Среда Эндо
Среду готовят по прописи на этикетке.
Для повышения дифференцирующих свойств в готовую и охлажденную до 60 — 70 С среду
перед розливом в чашки допускается прибавлять на 100см’среды 0.2
c
m
j
5 %-го спиртового раствора
основногофуксина.
Применяют селективную среду для определения бактерий группы кишечных палочек.
5.3.4 Солодовое сусло
Приготовление солодового сусла массовой долей сухих веществ II — 12
%
и 7 —8
%
—по
ГОСТ 10444.1 (5.44).
Можно использовать готовое неохмеленное пивное сусло после предварительной обработки. Гото
вое сусло массовой долей сухих веществ II — 12 % стерилизуют при (112+ 1) "С в течение 15 мин.
Затем сусло фильтруют, разливают в стерильную посуду и стерилизуют при (116 ± 1)‘С в течение
20 мин.
Применяютсолодовое сусло: массовой далей сухих веществ 11 — 12
%
для выявления дрожжей и
плесневых грибов в концентратах напитков и соковых напитках с мякотью плодов, массовой долей
сухих веществ
7
—8 % — для приготовления солодового агаризованного сусла.
Солодовое сусло можно заменить виноградным суслом с аналогичным содержанием сухих ве
ществ.
5.3.5 Солодовое агаризованное сусло
К 1дм’ отфильтрованного сусла массовой долей сухих вешеств 7 - 8
%
добавляют 20 г агара.
Среду расплавляют на водяной бане, рахливают по стерильным пробиркам или колбам и стерилизуют
при температуре (116 ± 1)*С в течение 20 мин.
Применяютдля определения дрожжей и плесневых грибов.
5.3.6 Среда Сабуро
Среду готовят по прописи на этикетке. Из отдельных ингредиентов готовят следующим образом:
40.0 г глюкозы, 10,0 г пептона. 18.0 г агара добавляют к I дм’ дистиллированной воды. Смесь
подогревают, периодически помешивая до растворения составных частей, охлаждают до 45 - 55 "С.
устанавливают pH таким образом, чтобы после стерилизации она составляла при (25 ± 2) *С6.5 ±0,1,
разливают в мерные колбы и стерилизуют 15 мин при температуре (121 ± Г) *С.
Применяютдля определения дрожжей и плесневых грибов.
5.3.7 Готовые питательные среды хранят при температуре (4 ± 2) "С не более одного месяца.
5.3.8 Допускаются к использованию питательные среды, диагностические препараты и системы
идентификации производства зарубежных фирм, предназначенные для целей описываемых методов.
Питательные среды и биологические препараты зарубежного производства должны иметь международ
ный сертификат качества ISO 9000 или EN 29000.
При использовании следует руководствоваться рекомендациями фирмы-производителя.
Все питательные среды и препараты отечественного производства должны соответствовать требо
ваниям нормативного документа и иметь инструкцию по применению.
5.4 Подготовка мембранных фильтров и фильтровального прибора
5.4.1 Для фильтрации используют мембранные фильтры диаметром от 50до 35 мм размерами пор
0.65 - 0,45 мкм в стерильной и нестерильной упаковках.
Нестерильные фильтры стерилизуют непосредственно перед их использованием: кипячением или
другим способом, рекомендованным фирмой-изготовителем.
Дтя кипячения фильтры помещают в стеклянный стакан или медицинский стерилизатор с дис
тиллированной водой, нагретой до 30 *С, медленно доводят до кипения на слабом огне, после чего
поду меняют и кипятят 10 мин. Во избежаниедеформации фильтров во время кипячения в стакан или
медицинский стерилизатор помещают стеклянные шарики или сетку.
5.4.2 Для определения дрожжей и плесневых грибов используют фильтры размерами пор
0.65 —0.45 мкм; для бактерий - 0,45 мкм.
5.4.3 Перед фильтрацией пробы воронку и столик обтирают ватным тампоном, смоченным
96 %-м ректификованным этиловым спиртом, и стерилизуют фламбмрованием в пламени горящего
тампона. После охлаждения на столик кладутфламбироваиным пинцетом мембранный фильтр, уста
навливают воронку и закрепляют седержателем.
Использование одноразовых стерильных комплектов, состоящих из воронки и мембраны, позво
ляет исключитьстадиюстерилизации фильтровального прибора.
2055