ГОСТ 30712-2001
стекло пал пламенем горелки. На одном стекле можно готовить по шесть - восемь мазков, отделяя их
один от другого линиями, проведенными с лицевой стороны стекла.
Препарат ополаскивают водой и тщательно просушивают фильтровальной бумагой.
После просушивания на препарат наносят с избытком реактив 2, приготовленный по 5.2.1, так,
чтобы жидкость покрывала всю поверхность стекла. Продолжительность окрашивания 0,5 - 1мин.
После окрашивания препарат быстро ополаскивают проточной водой, направляя струю под углом на
стекло. Препарат просушивают фильтровальной бумагой и просматривают под микроскопом с иммер
сионной системой (объектив 90’). При таком способе окраски по Граму грамположительные бактерии
окрашиваются в темно-фиолетовый цвет, неотрицательные бактерии —вбуровато-розовый цвет.
6.3.2 Обработка результатов
6.3.2.1 При отсутствии на среде Эндо колоний, типичных для бактерий группы кишечных пато-
чек (колиформных бактерий) или отсутствии признаков роста на среде Кесслер с лактозой (отсутствие
газа в подлавке или помутнения среды) дают заключение об отсутствии БГКП (колиформных бакте
рий) и о соответствии исследуемого продукта микробиологической норме.
6.3.2.2 При образовании помутнения и газа в среде Кесслер и роста на среде Эндо типичныхдля
колиформных бактерий колоний и последующей идентификации —обнаружение неотрицательных,
не содержащих спор палочек, указывает на наличие БГКП (колиформныхбактерий) в анализируемом
объеме продукта и несоответствие его микробиологической норме.
6.3.2.3 При обнаружении БГКП только в одной из повторностей - анализ следует повторить.
Если БГКП будут вновь обнаружены в одной из повторностей, то это свидетельствует о несоответ
ствии продукта микробиологической норме.
6.4 Определение дрожжей и плесневых грибов
Метод основан на посеве определенных количеств продукта на/в селективные среды, культиви
ровании посевов, подсчете псех видимых колоний дрожжей и плесневых грибов, типичных по макро-и
(или) микроскопической морфологии.
6.4.1 Проведение испытаний
Определение количества дрожжей и плесневых грибов в продуктах проводят глубинным или
поверхностным методами, а также с применением мембранной фильтрации.
Выявление дрожжей и плесневых грибов в продуктахс мякотью плода или загустителями прово
дят накопительным методом.
6.4.1.1 Посевы для определения количества дрожжей и плесневых грибов
6.4.1.1.1 Продукты в количестве 1см5 высевают параллельно вдве чашки Петри. Посевы залива
ют расплавленной и охлажденной до 45 - 48 "С средой, приготовленной по 5.3.5 или 5.3.6. Посев
глубинным методом проводят по ГОСТ 26670 (4.1).
6.4.1.1.2 Пробы продукта в количестве 0,1 или 0,2 см3наносят на поверхность одной из агаризо-
ванных сред, приготовленных по 5.3.5 гаи 5.3.6. разлитых вдве чашки Петри, и шпателем равномерно
распределяют по поверхности среды. Подготовку чашек Петри со средой к посеву и посев поверхност
ным методом проводят по ГОСТ 26670 (4.2).
6.4.1.1.3 При использовании метода мембранной фильтрации в воронку фильтрованного аппарата
вносят нормируемый объем исследуемой пробы (напитка, сиропа, концентрата напитка). Для лучшей
фильтрации проб сиропа концеггтратов напитков в воронку сначала вносят 5-10 см5стерильной
воды, а затем исследуемую пробу. Концентраты напитков (нормируемый объем 10 г/см’) перед филь
трацией растворяют в 30 —40 дм’ стерильной воды.
Фильтрацию проводят по 5.4. Затем фильтр переносят в чашки Петри на поверхность агари-
зованной среды, приготовленной по 5.3.5 или 5.3.6. Чашки закрывают и на дне против фильтра ставят
номер пробы. Из каждой пробы делают посев в двух повторностях.
6.4.1.1.4 Чашки с посевами выдерживают в термостате при температуре (24 ± 1)‘С в течение
5 сут с предварительным учетом выросших колоний через 2 суг. Если имеется один термостат и
одновременно необходимо выращивать посевы для определения КМЛФАнМ или КМАэМ
при (30 ± 1) *С, а также дрожжей и шгесиевых грибов при (24 ± 1) *С, то допускается
выращивание последних при (30 ± I) *С. Рекомендуется иметь на каждую заданную
температуру отдельный термостат.
Через 2 сут термостатирования проводят учет типичных колоний, а через 5 сут —окончательный,
наблюдая за ростом дрожжей и плесневых грибов визуально, а при необходимости просматривают
микроскопический препарат.
6.4.1.1.5 Рост дрожжей на питательной среде сопровождается образованием крупных, выпуклых,
матово-блестящих, плотных с ровными краями серовато-белых колоний.
Развитие плесневых грибов на среде сопровожтается образованием пушистого мицелия различной
окраски (белой, черной, зеленоватой).
2099