ГОСТ 33918—2016
Т аб лиц а 1
Контрольный штамм микроорганизмаУсловия инкубации
Питательная среда
ВидШтаммТемператураВремя инкубации
Жидкая тиогликоле
вая среда
Bacillus subtilis АТСС" 6633
Staphylococcus aureus АТСС* 6538-Р
Pseudomonas aeruginosa АТСС 9027
Clostridium sporogenes ГИСК** 272
(32.5 ± 2.5) *C3 сут
Жидкая среда
Сабуро
Candida albicans NCTC’" 885-653
(22.5 ± 2.5) *C5 сут
*АТСС — Американская коллекция типовых культур. США.
••ГИСК — Государственная коллекция патогенных микроорганизмов ГИСК им. Л А Тарасевича, Россия.
■*“NCTC — Национальная коллекция типовых культур.
П р и м е ч а н и е — Допускается использовать другие эквивалентные штаммы из официально признанных
коллекций микроорганизмов.
По истечении срока инкубации на исследуемых питательных средах должны отсутствовать визу
ально определяемые признаки роста микроорганизмов, после чего среда может быть использованадля
проведения исследований.
Каждую новую приготовленную партию питательной среды подвергают контролю. Для проверки
качества питательной среды от партии приготовленной среды отбирают 5 % пробирок и помещают в
термостат при температуре, указанной в таблице 1. и инкубируют в течение не менее 14 сут параллель но
с посевом на стерильность.
8.2.5 Контроль эффективности
Эффективность питательных сред определяют для каждой партии коммерческой питательной
среды (сухой и готовой к использованию) и для каждой партии среды, приготовленной в лаборатории.
Эффективность питательных сред определяют с периодичностью один раз в квартал.
8.2.5.1 Подготовка контрольных (референсных) штаммов микроорганизмов
Контрольные штаммы следует получать из официально признанной коллекции микроорганизмов.
Контрольный штамм микроорганизма готовят за сутки до исследования. Для этого его высевают со
среды хранения (например, с полужидкого агара) на пробирки со скошенным питательным агаром или
средой в соответствии с таблицей 1. Посевы инкубируют в условиях, указанных в таблице 1.
Из полученной суточной агаровой культуры контрольного штамма микроорганизма готовятсуспен
зию.
Приготовление суспензий с заданной концентрацией клеток контрольного штамма микроорга
низма осуществляют с использованием оптического стандарта мутности на 10 ед. соответствующего 1
млрд микробных клеток/см3.
В стерильную пробирку вносят 3—4 см3 разбавителя. В качестве разбавителя может быть исполь
зован физиологический раствор (см. 8.3.1) или пептонно-солевой разбавитель (см. 8.3.3). Агаровую
культуру контрольного штамма микроорганизма бактериологической петлей переносят в пробирку и
растирают по внутренней поверхности пробирки, постепенно смешивая с содержащимся в ней разба
вителем.
Возможно приготовление суспензии методом смыва выросшей культуры контрольного штамма
микроорганизма со скошенного агара 5 см3разбавителя.
Полученную взвесь микроорганизмов интенсивно встряхивают, добиваясь полного и равномерно
го распределения клеток. Мутность полученной взвеси сравнивают с мутностью отраслевого стандарт
ного образца мутности, который также предварительно тщательно встряхивают.
При визуальном несоответствии мутности приготовленной суспензии стандарту ее доводят либо
добавлением агаровой культуры, либо добавлением разбавителя. После каждого внесения культуры
или разбавителя суспензию тщательно встряхивают.
При совпадении мутности приготовленной суспензии и мутности оптического стандарта считает
ся. что концентрация клеток контрольного штамма микроорганизма в данной суспензии примерно соот
ветствует значению, указанному для данного стандарта (0.9—1х109 клеток/см3).
7