ГОСТ 33918—2016
7.2.1 Водорастворимая продукция
Водорастворимую продукцию перемешивают и асептически переносят в питательную среду (ме
тод прямого посева) или на фильтр (метод мембранной фильтрации).
7.2.2 Нерастворимая в воде продукция
Содержимое упаковочной единицы продукции переносят в пробирку подходящей вместимости,
содержащую раствор полисорбат-80 (см. 8.3.2) в отношении 1 : 10. и тщательно перемешивают.
7.3 Подготовка пробы для проведения повторного испытания
Для проведения повторного испытания используют шесть единиц продукции, отобранных по 7.1,
с учетом 7.2.1 (7.2.2).
Для проведения повторного испытания методом прямого посева составляют три объединенные
пробы и проводят посев из каждой из этих проб.
Для проведения повторного испытания методом мембранной фильтрации составляют одну объ
единенную пробу из шести единиц продукции.
8 Подготовка к испытанию
8.1 Приготовление и хранение питательных сред
8.1.1 Приготовление жидкой тиогликолевой сроды
Для приготовления жидкой тиогликолевой среды в посуде подходящей вместимости смешивают
15.0 г панкреатического гидролизата казеина. 5.0 гдрожжевого экстракта. 2.5 г хлористого натрия. 5.0 г
глюкозы. 0.5 г цистеина, 0.5 г тиогликолевой кислоты или тиогликолята натрия. 0,75 г микробиологиче
ского агара (заранее замоченного в воде).
Доводят объем раствора дистиллированной водой до 1000 см3 и нагревают на электрической
плитке при постоянном перемешивании до полного растворения всех компонентов. Затем фильтруют
через ватно-марлевый фильтр, добавляют 1.0 см3свежеприготовленного раствора резазурина натрия,
перемешивают и разливают по 10 см3в пробирки вместимостью 20 см3. Среду стерилизуют в автокла ве
при температуре (121 ± 1) °С в течение 15 мин.
Допускается приготовление жидкой тиогликолевой среды без резазурина.
После стерилизации и охлаждения pH среды должен быть равен (7.0 ± 0.2) ед.рН при измерении
при комнатной температуре.
Хранят при температуре от 2 °С до 8 °С в защищенном от света месте не более 30 сут.
8.1.2 Приготовление жидкой среды Сабуро
Для приготовления жидкой среды Сабуро в посуду подходящей вместимости наливают 1000 см3
дистиллированной воды и добавляют 10 г сухого ферментативного пептона, кипятят на электрической
плитке в течение 10 мин, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, прибавляют 40 г глюкозы, разлива
ют по 10 см3в пробирки вместимостью 20 см3и стерилизуют в автоклаве при температуре (121 ± 1) ’С в
течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH среды должен быть равен (5,6 ± 0.2) ед.рН при измерении
при комнатной температуре.
Хранят при температуре от 2 °С до 8 °С не более 30 сут.
8.1.3 Условия и сроки хранения питательных сред
Необходимо соблюдать условия и сроки хранения питательных сред. Сухие питательные среды и
реактивы хранят в сухом защищенном от света месте при температуре и влажности воздуха, рекомен
дуемых производителем.
Обеспечивают герметичность вскрытых упаковок со средами. Повышение влажности и комкова
ние сухой питательной среды существенно ухудшают ее качество. Если питательная среда упакована
в пакет из ламинированной бумаги и весь объем среды не используется за один раз. то после вскрытия
пакета оставшуюся часть среды переносят в чистую сухую емкость из оранжевого стекла (или другого
светозащитного инертного материала) с плотно закрывающейся крышкой. Емкость маркируют.
Приготовленные в лаборатории питательные среды должны быть промаркированы с указанием
названия среды, даты ее приготовления и срока ее годности.
Если при хранении тиогликолевой среды, содержащей резазурин. верхний слой среды (более
1/3 объема) окрасится в розовый цвет, то среду можно регенерировать нагреванием на кипящей во-
5