ГОСТ ISO 22160—2015
7.1.3 Сырое молоко
Пипеткой вносят 1 мл пробы для испытания в мерную колбу объемом 100 мл с одной меткой (5.5)
(или соответствующее количество, чтобы активность после разбавлениясоставляла менее 7000 мЕд/л).
Доводят до метки молоком, не содержащим щелочной фосфатазы (7.2). Тщательно перемешивают.
7.1.4 Ароматизированные молочные и сливочные продукты
Используют пробыдля испытания, полученные в необходимом количестве. Пробы для испытания
вязких продуктов могут потребовать точного определения вносимого пипеткой объема с использовани ем
массы (100 мкл = 100 мг). После внесения пробы протирают кончик пипетки. Возможно, для точного
дозирования понадобятся пипетки с другой модификацией отверстия (с более широким отверстием).
7.2 Молоко без щелочной фосфатазы
Молоко в количестве 35 мл, не содержащее щелочной фосфатазы (отрицательная проба для ис
пытания), или необходимый объем рабочей части пробы (7.1.2. 7.1.3 или 7.1.4) подготавливают путем
нагревания в пробирке на водяной бане (5.8) при температуре 95 °С. Рабочую часть пробы после на
гревания до 95°С выдерживают при этой температуре в течение 1 мин. Затем быстро охлаждают.
Отрицательная проба используется в качестве 0 (нулевого) градуировочного раствора и должна
иметь среднее значение менее 5 мЕд/л (или менее 15 мЕд/л с ароматизированными молочными про
дуктами и сливочными продуктами) в соответствующим образом отградуированном канале люмино-
метра. При температуре 4 °С отрицательные пробы можно хранить в течение 48 ч.
Жидкое молоко может хранитьсядо 6 мес, если его хранят в замороженном виде при температуре
минус 15 “С или ниже. Оттаивают отрицательную пробу в воде при комнатной температуре. Пробу энер
гично встряхивают, чтобы сделать ее однородной перед использованием. Повторно не замораживают.
Следует отметить, что некоторые молочные продукты, такие, например, как овечье молоко, будут
осаждаться и расслаиваться, если отрицательная проба для испытания была подготовлена при темпе
ратуре 95 °С в течение 1 мин. В этом случае требуется более низкая температура в течение длитель
ного времени, например 63 °С в течение 30 мин.
8 Проведение испытания (см. приложение А)
8.1 Градуировка
8.1.1 Строят градуировочную кривую для каждого типа продукта, который будут испытывать. На
чинают с установки фона люминометра (Вд) на 100 и коррекции {Сг) на 100.
При осуществлении настроек применяют руководство по эксплуатации люминометра. Градуиро
вочные кривые являются стабильными, и их следует запускать, если используют новые лартии/номера
партий субстрата эфира диоксетана (4.1) и останавливающий раствор (4.2). Графическое представле
ние для градуировки приведено в приложении А.
П р и м е ч а н и е — Режим градуировки, согласно некоторым руководствам по эксплуатации люминометра,
представлен с применением этапов по 8.1.1—8.2.2 (меню градуировки предстаапяет собой пункт 8 в главном
меню). Выбирают градуировку щелочной фосфатазы. Выбирают канал для градуировки. Выбирают градуировку.
Выбирают для градуировки рабочую часть пробы, например молоко, сливки или шоколад (ароматизированный
молочный продукт) или другое. Люминометр подсказывает пользователю следующие этапы.
8.1.2 При испытании используют три пробирки с градуировочными пробами. Используют пипетку
с фиксированным объемом (5.3), снабженную наконечником для внесения 100 мкл субстрата эфира
диоксетана (4.1) на дно трех мини-пробирок (5.2).
8.1.3 Для рабочих частей проб, полученных по 7.1.2—7.1.4, пипеткой с фиксированным объемом
(5.3) и чистым наконечником добавляют 100 мкл отрицательной пробы для испытания (7.2) в каждую
пробирку. Содержимое пробы помещают на дно пробирки, чтобы обеспечить контакт всей пробы с суб
стратом. Содержимое пробирок смешивают, поместив их в штатив, возвратно-поступательными движе
ниями примерно 10 раз в течение 5 с.
8.1.4 Мини-пробирки (8.1.3) помещают на 3 мин в блок инкубатора (5.7). установленного на темпе
ратуру 35 °С. В конце инкубации к содержимому всех мини-пробирок с помощью дозатора с фиксиро
ванным объемом (5.4) в течение 15 с добавляют 1.0 мл останавливающего раствора (4.2).
8.1.5 Мини-пробирки вынимают из инкубатора. Каждую пробирку накрывают колпачком и энер
гично встряхивают в течение 5 с. Если необходимо, отвинчивают колпачок и крепят пробирку к адап
теру люминометра. Пробирку вставляют в люминометр. При завершении подсчета (звуковой сигнал)
4