ГОСТ ISO 22160—2015
Среднее значение для рабочего градуировочного раствора В (один из двух — S, или В2) должно
быть между 145 мЕд/л и 205 мЕд/л. Если одно значение более чем на 30 % отличается от среднего
значения, определение повторяют.
Если оба средних значения градуировочного раствора находятся в диапазоне, переходят к этапу
по 8.3.3.
Если среднее значение одного из градуировочных растворов все еще выходит за пределы диа
пазона. переходят к этапу по 8.1.1.
8.3 Контрольные испытания и проверка градуировки
8.3.1 Испытание отрицательной контрольной пробы
Испытание отрицательной контрольной пробы проводят в соответствии с процедурой определе
ния (8.4) без добавления рабочей части пробы (8.4.2). Отрицательные контрольные испытания про
водят ежедневно для проверки градуировки люминометра и действия реагента. Система считается
проверенной (отрицательный результат), если полученные уровни щелочной фосфатазы составляют
менее 5 мЕд/л в соответствующем отградуированном канале люминометра.
8.3.2 Испытание положительной контрольной пробы
Положительную контрольную пробу регидратируют (4.4) с предварительно испытанным молоком
(молочным напитком), показывающим среднюю активность щелочной фосфатазы менее 5 мЕд/л (ме
нее 15 мЕд/л с ароматизированными молочными продуктами или сливочными продуктами) или подго
товленной отрицательной пробой (7.2).
Испытание положительной контрольной пробы проводят ежедневно для проверки градуировки
люминометра и эффективности реактива. Если установленное значение превышает 585 мЕдГл или
составляет менее 300 мЕд/л. повторяют с другой рогидратированной положительной контрольной про
бой. Если полученное значение по-прежнему находится вне диапазона, выполняют повторную градуи
ровку люминометра (см. 8.1).
8.3.3 Проверка градуировки
После выполнения этапов градуировки по 8.1 и 8.2 приступают к испытанию отрицательной кон
трольной пробы (8.3.1) и трижды проводят определение положительной контрольной пробы (8.3.2) для
проверки результата градуировки.
Отрицательная контрольная проба должна выдавать значение менее 5 мЕд/л, а испытание
среднего значения положительной контрольной пробы (N = 3) должно быть в диапазоне 380 мЕд/л —
510 мЕд/л. Если значение отрицательной контрольной пробы выходит за пределы диапазона, исполь
зуют свежий субстрат (4.1) и повторяют испытание. Если значение положительной контрольной пробы
находится вне диапазона или любое значение превышает 5855 мЕд/л или составляет менее 300 мЕд/л,
проверяют температуру останавливающего раствора (4.2) и повторяют испытание с другой регидрати-
рованной положительной контрольной пробой. Если полученное значение по-прежнему находится вне
диапазона, выполняют повторную градуировку люминометра (см. 8.1.1).
П р и м е ч а н и е — Тройное определение положительной контрольной пробы используют для проверки
градуировки. После проверки градуировки ежедневно выполняют только одно определение в заданном диапазоне
(см. 8.3).
Когда градуировочные растворы и контрольные пробы находятся в диапазоне, приступают к опре
делению (8.4). В люминометре (5.1) могут быть установлены до 10 отдельных градуировочных каналов
для различных молочных продуктов. Рабочие части проб (7.1.2 и 7.1.4) следует рассматривать в соот
ветствующем канале, отградуированном под данную рабочую часть пробы. Сырое молоко (7.1.3) сле
дует рассматривать в канале, отградуированном для пробы для испытания, используемой в качестве
растворителя (7.2).
8.4 Определение
8.4.1 Ограничивают количество пробирок в испытании до четырех. С помощью пипетки с фикси
рованным объемом (5.3) добавляют 100 мкл субстрата эфира диоксетана (4.1) в испытательные мини
пробирки (5.2), которые промаркированы в верхней половине.
8.4.2 К содержимому мини-пробирок (8.4.1) пипеткой с фиксированным объемом (5.3)с новым на
конечником добавляют 100 мкл подготовленной рабочей части пробы (7.1.1—7.1.4).
8.4.3 Содержимое пробирок перемешивают, поместив их в штатив, возвратно-поступательными
движениями примерно 10 раз в течение 5 с. Мини-пробирки и их содержимое (8.4.2) размещают в блоке
инкубатора (5.7) при температуре 35 °С.
8