ГОСТ 32835—2014
раз в месяц. На хроматограммах определяют площади пиков ПАТ и ОТА и по площади пика устанав
ливают градуировочную зависимость в интервале концентраций согласно 7.5. Рассчитывают коэф
фициент корреляции и отклонения рассчитанных значений массовой концентрации микотоксинов в
каждой градуировочной точке от фактического значения в соответствии с процедурой приготовления
градуировочных растворов (см. 7.5). Градуировку считают приемлемой, если коэффициент корреля ции
составляет не менее 0.999 (для ПАТ) и 0.965 (для ОТА). а относительное отклонение рассчитан
ного значения массовой концентрации от фактического значения не более ±10 %.
Вместо относительного отклонения приемлемость градуировочной характеристики может быть
оценена по относительному стандартному отклонению, которое не должно превышать 5 %.
8 Проведение испытаний
8.1 Экстракция
10 см3(V^,) предварительно тщательно перемешанной соковой продукции вносят в пробирку
для центрифугирования с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 см3. В пробирку добавляют
20 см3ацетонитрила и 15 г безводного сернокислого магния. Смесь интенсивно перемешивают в те
чение трех - пяти минут вручную или с помощью встряхивателя. После перемешивания полученный
экстракт центрифугируют в течение 10 мин при 4000 - 5000 об/мин при комнатной температуре или 5
мин при наличии центрифуги с охлаждением при температуре 5 °С. Измеряют общий объем экс
тракта после центрифугирования (V)- 18 - 19 см3(Уэ) экстракта, отобранного с помощью пипетки или
дозирующего устройства, переносят в остродонную колбу вместимостью 25 см1. Раствор концентри
руют до сухого остатка под током азота при комнатной температуре или на роторном испарителе при
температуре не более 40 °С и немедленно перерастворяют в 1 см3(V.) ацетонитрила.
При наличии на стенках сосуда нерастворимой карамельной пленки проводят ев разрушение в
ультразвуковой ванне в течение трех - пяти минут. Раствор переносят в пробирку типа Эппендорф
вместимостью 1.5 - 2.0 см3и центрифугируют при 10000 - 12000 об/мин в течение 3 - 5 мин. Отби рают
верхний слой и фильтруют через микрофильтр с размерами пор 0.2 - 0.4 мкм непосредственно в
микропробирку вместимостью 100 - 400 мм3. Для проведения испытания в ВЭЖХ-МС/МС систему
инжектируют 10 мм3приготовленной пробы.
8.2 Приготовление пробы из концентрированных продуктов
Концентрированные соки (пюре) восстанавливают водой до минимального уровня растворимых
сухих веществ, предусмотренного нормативными документами на конкретный вид соковой продукции.
Концентрированную соковую продукцию, минимальные уровни растворимых сухих веществ для которой
не предусмотрены, восстанавливают бидистиллированной водой до содержания растворимых сухих
веществ 11.2 %. Содержание растворимых сухих веществ контролируют по ГОСТ 29030.
Экстракцию восстановленных проб проводят по 8.1.
8.3 Проведение измерений
8.3.1 Общие условия
Инжекцию подготовленных по 8.1 проб и градуировочных растворов проводят в выбранной по
следовательности. Наиболее распространен способ, когда инжекция градуировочных растворов
начинает и завершает серию инжекций проб.
ВЭЖХ-МС/МС система должна быть настроена на режим SRM с переходами, обеспечивающи
ми селективное детектирование анализируемых микотоксинов. Времена удерживания и площади пи
ков определяют с помощью программного обеспечения для регистрации и расчета результатов ана
лиза. прилагаемого к ВЭЖХ-МС/МС системе. Примеры ВЭЖХ/МС/МС систем, условия разделения
и масс-спектрометрического детектирования приведены в приложении Б.
Испытания проб проводят в условиях повторяемости для двух параллельных определений в
соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1 (подраздел 3.14) и ГОСТ ИСО 5725-2.
8.3.2 Идентификация микотоксинов
Для идентификации микотоксинов времена удерживания, полученные на растворах проб, срав
нивают со временем удерживания соответствующих микотоксинов из градуировочных растворов. Для
подтверждения присутствия микотоксинов проводят сравнение соотношения интенсивностей сигна
лов из первого и второго m/z-перехода с соотношением интенсивностей сигналов микотоксинов из
градуировочных растворов.
7