ГОСТ 32641-2014
4.4.3 Клиническая биохимия
Клинические биохимические исследования для выявления обширного токсического воздействия
на ткани и. особенно, воздействия на почки и печень, проводят на образцах крови, полученных от
каждого животного, непосредственно перед или в ходе процедуры умерщвления (за исключением
животных, обнаруженных в состоянии агонии и/или промежуточно умерщвленных). При анализе
плазмы или сыворотки крови необходимо определять содержание натрия, калия, глюкозы, общее
содержание холестерина, мочевины, азота в составе мочевины крови, креатинина, общего белка и
уровня альбумина и более двух ферментов, указывающих на гепатоцеллюлярные эффекты (таких,
какаланин-аминотрансфераза,аспартат-аминотрансфераза,щелочнаяфосфатаза,гамма-
глутамилтранспептидаза и глютаминатдегидрогеназа) и желчных кислот. Анализ может также
включатьв себяопределение дополнительныхферментов(гепатическогоили прочего
происхождения) и билирубина, что может дать полезную информацию при определенных
обстоятельствах.
Дополнительно в течение последней недели исследований может быть проведен общий анализ
мочи, собранной за фиксированный промежуток времени, дляопределенияследующих
характеристик: внешний вид. объем, осмоляльность или удельная масса, уровень кислотности,
простой болок. глюкоза и кровь/эритроциты.
Кроме того, следует учитывать возможность проведения исследований для выявления в плазме
или сыворотке крови маркеров общего повреждения тканей. Другие исследования, которые следует
проводить, если известные свойства тестируемого вещества могут, или предполагается, что могут,
воздействовать на связанные особенности обмена веществ, включают в себя анализ на кальций,
фосфор, триглицериды, специфические гормоны и холинэстеразу. Эти анализы должны проводить
для веществ определенных классов или в зависимости от конкретного случая.
Несмотря на то, что в ходе международного анализа эндокринной системы, не было отмечено
явного преимущества в определении тироидиых гормонов (Т3, тироксин - Т4) и тиреостимулирующего
гормона, полезно сохранять образцы плазмы или сыворотки крови для измерения концентрации Т3, Т4
и тиреостимулирующего гормона (по выбору) с целью выявления воздействия на гипофизарно
щитовидный ствол. Для хранения эти образцы могут быть заморожены при температуре минус 20 °С.
Следующие факторы могут оказывать влияние на анализ вариабельности и абсолютной
концентрации гормонов:
-время умерщвления, из-за циркадных изменений концентрации гормонов,
-способ умерщвления, для избежания повышенного стресса у животных, который может влиять
на концентрацию гормонов;
-наборы для анализа для определения концентрации гормонов, которые могут отличаться от
стандартных наборов.
Окончательное определение химических веществ, влияющих на щитовидную железу, более
надежно при проведении гистопатологического исследования, чем при проведении анализа на уровне
гормонов.
Забор образцов плазмы, специально предназначенных для анализа гормонов, должен
проводиться в соответствующее время суток. Особое внимание рекомендуется уделять анализу Т3,
Т4 и тиреостимулирующего гормона на основании изменений гистопатологии щитовидной железы.
Цифровые значения, полученные при анализе концентраций гормонов, зависят от выпускаемых
промышленностью различных наборов реактивов. Соответственно, не представляется возможным
определить критерии эффективности, основываясь на данных за прошлые периоды. Наоборот,
исследовательские лаборатории должны стремиться к тому, чтобы контрольные коэффициенты
вариаций не превышали следующих значений: 25 для Т3 и Т4, и 35 для тиреостимулирующего
гормона. Все концентрации указываются в нг/мл.
Если исходных данных за прошлые периоды недостаточно, следует рассмотреть необходимость
проведения анализа переменных гематологического исследования или клинической биохимии до
начала введения препарата, или, желательно, на животных, не входящих в тестируемые группы.
4.5 Патология
4.5.1 Общая аутопсия
Все животные, участвовавшие в исследовании, подлежат аутопсии, которая включает
тщательное исследование внешней поверхности тела, всех отверстий, внутричерепной, грудной и
брюшной полостей и их содержимого. Печень, почки, надпочечники, яички, эпидидимис,
предстательная железа плюс семенные железы со свертывающей железой целиком, вилочковая
железа, селезенка, мозг и сердце всех животных (за исключением животных, обнаруженных в
состоянии агонии и/или промежуточно умерщвленных до окончания исследования) должны быть
надлежащим образом отделены от всех прилегающих тканей, в зависимости от конкретного случая, и
взвешены во влажном состоянии - сразу после вскрытия, чтобы избежать высыхания. Особой
6