ГОСТ 32643—2014
клинической патологии и гистопатологии, расчеты, какими могут быть концентрации NOAEL (уровень
отсутствия наблюдаемого вредного воздействия после введения вещества, максимальной дозы, не
вызывающей обнаруживаемого вредного воздействия на здоровье) и МТС (минимальная токсическая
концентрация) в основном исследовании. Руководитель исследования по определению диапазона
концентраций может применять для установления порога раздражения дыхательных путей
(например, с помощью гистопатологии дыхательных путей, тестирования легочной функциональной
пробы или бронхоальвеолярного лаважа), наивьюшей концентрации, которая не вызывает стресса у
животных и изменения параметров, которые наиболее полно характеризуют токсичность
исследуемого вещества.
Определение диапазона концентраций может состоять из одного или более уровней
концентрации. Не более трех самцов и трех самок следует подвергать воздействию каздого уровня
концентрации. Определение диапазона концентраций должно длиться не менее пяти, но, как
правило, не более 14 дней. Обоснование выбора концентрации для основного исследования
необходимо отразить в отчете по основному исследованию. Цель основного исследования -
выявление зависимости «концентрация-ответ», базирующейся на основе наиболее чувствительных
показателей. Низкий уровень концентрации в идеале не должен вызывать наблюдаемого
токсического эффекта, тогда как высокий уровень концентрации должен вызывать явную токсичность,
не приводя к чрезмерному стрессу у животных и не влияя на продолжительность их жизни (3).
При выборе уровня концентрации для определения диапазона концентраций вся имеющаяся
информация, включая данные о зависимости активности препарата от структуры вещества и данные по
сходным химикатам, должны быть учтены (см. раздел 1). Определение диапазона концентраций
может подтверждать/опровергать то, какие показатели являются наиболее чувствительными,
например, ингибирование холинэстеразы для органофосфатов, образование метагемоглобина путем
эритроцитотоксических агентов,тиреоидные гормоны(Т3. Т4) длятиреотоксинов.белок,
лактатдегидрогеназа (LDH), или нейтрофилы в бронхоальвеолярном лаваже для безвредных плохо
растворимых частиц или аэрозолей с легочно-раздражающим действием.
2.3.3 Основное исследование
Основное исследование подострой токсичности, как правило, состоит из трех уровней
концентрации, а также, при необходимости, из параллельно проводимого негативного контроля
(воздушного) и/или исследования среды (см. пункт 2.3.4). Все имеющиеся данные следует применять
для выбора надлежащего уровня экспозиции, включая результаты системных токсикологических
исследований, метаболизма и кинетики (внимание необходимо уделить тому, чтобы избежать
уровней высоких концентраций, которые усиливают кинетические процессы). Каждая испытуемая
группа состоит из 10 грызунов(5 самцов и 5 самок), которых подвергают воздействию
тестируемого вещества ежедневно на протяжении шести часов, пять дней в неделю в течение
четырех недель (общая продолжительность исследования - 28 дней). Животных могут подвергать
воздействию также семь дней в неделю (например, при тестировании вдыхаемых фармацевтических
продуктов). Если известно, что один пол более чувствителен к воздействию тестируемого вещества,
животные разных полов могут подвергаться воздействию различных уровней концентраций с целью
оптимизировать зависимость «концентрация-ответ». Если воздействию «только через нос»
подвергают грызунов других видов, помимо крыс, то можно отрегулировать максимальную
продолжительность воздействия для минимизации дистресса, характерного для данного вида. Если
продолжительность экспозиции составляет менее шести часов в день, или. при необходимости,
применяют долгосрочное (например. 22 ч в день) исследование с воздействием «через все тело»,
следует привести обоснование (см. документ [2]). Во время экспозиции рекомендуется голодание
животных, если только экспозиция не превышает шести часов. Во время воздействия «через все
тело» животным можно давать воду.
Выбранные целевые концентрации должны идентифицировать органы-мишени и показывать
четкую зависимость «концентрация-ответ»:
-высокий уровень концентрации должен вызывать токсический эффект, но не приводить к
затяжным признакам интоксикации или летальности, что может препятствовать правильной оценке;
-средний(е) уровень(уровни) концентрации должен быть между низким и высоким уровнями
концентрации для градации токсических эффектов.
-низкий уровень концентрации должен вызывать слабые эффекты или вообще не вызывать
признаков интоксикации.
2.3.4 Вспомогательное (реверсивное) исследование
Вспомогательное (реверсивное) исследование можно применять для наблюдения за
обратимостью, стойкостью или отдаленными проявлениями интоксикации после эксперимента в
течение соответствующего времени, но не более 14 дней. Вспомогательные (реверсивные) группы
3