ГОСТ 32771—2014
7 Проведение измерений
7.1 Условия проведения хроматографических измерений
Элюент - фосфатный буферный раствор по 6.1.
Режим элюирования - изократический.
Температура колонки. °С - (25 ± 5).
Длина волны спектрофотометрического детектора, нм -210.
Скорость потока подачи элюента, см3/мин - 0,8-1 (ориентировочное значение).
Объем пробы, мм31- 5-10.
П р и м е ч а н и е - В зависимости от типа применяемого хроматографа и хроматографической колонки
допускается изменение условий измерений, обеспечивающих необходимое разделение компонентов пробы.
7.2 Проведение измерений
Перед проведением измерений хроматографическую систему кондиционируют подвижной фа
зой до установления стабильной базовой линии.
Проводят два параллельных измерения проб, подготовленных по разделу 5, при соблюдении
условий повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО 5725-1 (подраздел 3.14).
Регистрируют площадь пиков соответствующих органических кислот. В случае, если массовая
концентрация (массовая доля) органической кислоты в пробе настолько максимальна, что площадь
соответствующего пика выходит за верхнюю границу диапазона градуировки хроматографа, то подго
тавливают новую пробу с другим разбавлением и измерение повторяют.
В случае взаимного влияния отдельных кислот друг на друга для более эффективного разде
ления допускается последовательное соединение двух колонок (см. 4.3) для хроматографического
разделения всего перечня органических кислот (см. 4.21). В этом случае требуется построение до
полнительной градуировочной зависимости для данной системы последовательно соединенных ко
лонок.
Примеры хроматограмм модельной смеси органических кислот для различных типов колонок
приведены в приложении Б.
Время выхода органических кислот характеризуется величиной коэффициента емкости К, ко
торый не зависит от скорости подачи элюента.
Коэффициент емкости вычисляют по формуле
(3)
где гя- время удерживания органической кислоты, мин;
(э - время удерживания несорбирующегося вещества, мин. вычисляют по ГОСТ 17567.
Типичные значения коэффициентов емкости трех групп органических кислот в соковой продук
ции представлены в таблице 7.
Т а б л и ц а 7 - Типичные значения коэффициентов емкости органических кислот
Наименованиекислоты
Коэффициентемкости К
Наименование группы органическихкислот
Группа А
Группа Б
Группа В
Винная
Хинная
Яблочная
Лимонная
Щавелевая
Изолимонная
Молочная
Янтарная
Шикимовая
Фумаровая
0.20
0.30
0.71
2.68
0.14
0.81
1,20
2,92
0.96
3.04
П р и м е ч а н и е - Оценку эффективности хроматографических колонок проводят в соответствии с приложе
нием!^________________________________________________________________________________________
Вводимые объемы градуировочного раствора и пробы должны быть одинаковыми.
8