ГОСТ 32477—2013
[{например, происхождение осадка или его компонентов. pH и концентрация аммиака в поровой воде
(полевые отложения)], содержание общего органического углерода (ООУ), распределение частиц по
размерам (соотношение песка, ила и глины) и сухой остаток [6].
4Принцип метода
4.1Испытание состоит из двух стадий: фаза поглощения (экспозиция) и фаза выведения
(пост-экспозиция). Во время фазы поглощения червей подвергают воздействию осадка, содержащего
исследуемое вещество, с поверхностным слоем реконструированной воды, уравновешенного соот
ветствующим образом [11]. Контрольные группы червей находятся в аналогичных условиях, но без
содержания исследуемого вещества.
4.2Для фазы выведения червей перемещают в систему осадок - вода, не содержащую
исследуемого вещества. Фаза выведения необходима для получения информации о скорости, с кото
рой тестовые организмы выделяют исследуемое вещество [19].[25]. Фаза выведения требуется все
гда. если поглощение исследуемого вещества во время фазы экспозиции было незначительным (на
пример, нет статистической разницы между концентрацией исследуемого вещества в тестовом и кон
трольном организмах). Если равновесное состояние не было достигнуто во время фазы поглощения,
определение кинетики - BAFK. констант скорости поглощения и выведения - может быть сделано с
использованием результатов фазы выведения. Изменение концентрации исследуемого вещества
в/на черве контролируют на протяжении обоих этапов испытания.
4.3Во время фазы поглощения измерения проводят до момента выхода ВАР на плато
или достижения равновесного состояния. По умолчанию продолжительность фазы поглощения долж
на составлять 28 дней. Практический опыт показывает, что фаза поглощения продолжительностью от
12 до 14 дней достаточна для ряда устойчивых, нейтральных органических веществ для достижения
равновесного состояния [6].[8].[9].
4.4Однако, если равновесное состояние не достигается в течение 28 дней, фаза выведе
ния начинается с переноса водных олигохет в сосуды, содержащие ту же среду, но без исследуемого
вещества. Фаза выведения заканчивается, когда либо достигается10 % уровень концентрации, из
меренной в червях на 28-й день фазы поглощения, либо через 10дней (максимальной продолжи
тельности). Остаточный уровень в червях в конце фазы выведения регистрируется в качестве допол
нительной конечной точки, например, как невыведенный остаток (NER). Коэффициент биоаккумуля
ции ВAFSSрассчитывают как соотношение концентрации в черве Сли в осадке Csпри очевидном рав
новесном состоянии и как кинетический фактор биоаккумуляции BAF
k
как соотношение константы
скорости поглощения из осадка
К-.
и константы скорости выведения Ко. предполагая кинетику первого
порядка. Если стационарное состояние не достигается в течение 28 дней. BAFKрассчитывают из кон
стант скоростей поглощения и выведения. Расчет приведен в приложении В. Если использование ки
нетики первого порядка является неприемлемым, необходимо использовать более сложные модели.
4.5Если плато не достигается в течение 28 дней, фаза поглощения может быть продлена
для отобранных групп червей с проведением дальнейших измерений до достижения равновесного
состояния; параллельно фаза выведения должна быть запущена на 28-й день фазы поглощения.
4.6Константа скорости поглощения, константа скорости выведения (или константы, когда
используют более сложные модели), кинетический фактор биоаккумуляции BAF
k
и по
возможности
доверительные интервалы для каждого из данных параметров рассчитывают из модельных уравне
ний (приложение В для моделей). Адекватность любой модели может быть определена из коэффи
циентов корреляции или коэффициентов детерминации (коэффициенты, близкие к 1. указывают на
хорошую алроксимацию).
4.7Для уменьшения вариабельности в результатах испытаний для органических веществ
с высокой липофильностью коэффициенты биоаккумуляции должны быть дополнительно выражены в
связи с содержанием липидов в тестовых организмах и содержания органического углерода (ООУ) в
осадке (фактор аккумуляции в биоте-осадке или BSAF в килограммах ТОО в осадке на килограмм со
держания липидов в черве). Данный подход основан на опытных и теоретических соотношениях для
водной среды, где для некоторых классов химических веществ есть четкая взаимосвязь между спо
собностью вещества к биоаккумуляции и его липофильностью. которая была четко установлена для
рыб в качестве модельного организма [14],[25].[27].
Существует также взаимосвязь между содержанием липидов в тестовой рыбе и наблюдаемой
биоаккумуляцией подобных веществ. Для донных организмов были установлены аналогичные корре
ляции [15] - [18]. Если доступно достаточное количество ткани червя, содержание липидов в тестовых
организмах может быть определено с использованием того же биологического материала, что и для
определения концентрации исследуемого вещества. Тем не менее целесообразно использовать акк
лиматизированных контрольных животных по крайней мере в начале или предпочтительно в конце
4