ГОСТ 32477—2013
тестовые организмы, например, путем выборочного кормления незагрязненной пищей, пища, необхо
димая для размножения и роста тестовых организмов, должна быть добавлена к осадку один раз пе ред
или во время внесения исследуемого вещества (приложение Г).
7.3.4Соотношение осадок-вода
Рекомендуемое соотношение осадок-вода составляет 1:4 [45]. Данное соотношение считает
ся пригодным для поддержания концентрации кислорода на соответствующем уровне и предотвра
щения накопления аммиака в надосадочных слоях воды. Содержание кислорода в вышележащих
слоях воды следует поддерживать на уровне не менее 40 % насыщения. Надосадочные слои воды в
тестовых сосудах должны быть аккуратно аэрированы (например. 2 - 4 пузырька в секунду) с помо
щью пипетки Пастера, расположенной примерно на 2 см выше поверхности грунта так. чтобы мини
мизировать взбалтывание осадка.
7.3.5Освещение и температура
Фотопериод при культивации и проведении испытания составляет 16 ч [1]. [6]. Интенсивность
освещения в тестовой зоне должна сохраняться на уровне около 500-1000 лк. Температура должна
составлять (20 ± 2) °С на протяжении всего теста.
7.3.6Тестовые концентрации
Одну тестовую концентрацию (как можно более низкую) используют для определения кинети
ки поглощения, также может быть использована вторая (более высокая) концентрация (например.
[46]). В таком случае образцы отбирают и анализируют в равновесном состоянии или по прошествии
28 дней для подтверждения того, что BAF оценивается по наименьшей концентрации [11]. Наиболь
шую концентрацию следует выбирать так. чтобы исключить негативное воздействие.
Пример
-
Выбирают примерно 1
%
наименьшей из известных хронических концентраций ЕСХ
как производных из соответствующих исследований токсичности.
Наименьшая тестовая концентрация должна быть значительно выше, чем предел аналитиче
ского обнаружения вещества в осадках и биологических образцах. Если эффективная концентрация
исследуемого вещества близка к аналитическому пределу обнаружения, рекомендуется использова
ние маркированного исследуемого вещества с высокой удельной радиоактивностью.
7.3.7Тестовые и контрольные повторные пробы
7.3.7.1Минимальное количество тестовых проб для кинетических измерений должно рав
няться трем для каждой точки отбора [11] в течение всей фазы поглощения и выведения. Также сле
дует использовать дополнительные пробы, например, для получения дополнительных данных. Для
фазы выведения соответствующее количество повторных проб готовится с осадком, не содержащим
исследуемого вещества, и надосадочной водой таким образом, чтобы подопытные организмы могли
быть перенесены из тестовых сосудов в сосуды, не содержащие исследуемого вещества, по оконча
нии фазы поглощения. Общее количество проб должно быть достаточным для фазы поглощения и
фазы выведения.
7.3.7.2Черви, предназначенные для отбора проб во время фазы выведения, могут быть
помещены в один большой контейнер, содержащий осадок с исследуемым веществом из партии, ко
торую используют для измерения кинетики поглощения. Необходимо продемонстрировать, что усло
вия испытания (например, глубина осадка, соотношение осадок-вода, загрузка, температура, качест во
воды) сопоставимы с условиями для проб, предназначенных для фазы поглощения. По окончании фазы
поглощения вода, осадок и образцы с червями должны быть отобраны из данного контейнера для
анализа и достаточное количество крупных червей без признаков недавней фрагментации долж но
быть аккуратно удалено и перенесено в образцы, подготовленные для фазы выведения (напри мер.
подесять особей на один образец).
7.3.7.3Если никакой другой растворитель, помимо воды, не используют, как минимум, де
вять повторных проб для отрицательного контроля (не менее трех проб в начале, трех - в конце фа
зы поглощения и трех - в конце фазы выведения) должны быть отобраны для биологического и фо
нового анализа. Если для внесения исследуемого вещества используют какой-либо растворитель,
следует проводить контроль с растворителем (не менее трех репликаций в начале, трех - в конце
фазы поглощения и трех - в конце фазы выведения). В этом случае по крайней мере четыре повтор ные
пробы для отрицательного контроля (без растворителя) должны быть представлены для отбора проб в
конце фазы поглощения. Данные повторные пробы должны быть биологически сравнимы с пробами
для контроля растворителя в целях получения информации о возможном влиянии раствори теля на
тестовые организмы. Более подробная информация приведена в приложении С.
7.3.8Частота измерений качества воды
В течение фазы поглощения и фазы выведения должны быть измерены по крайней мере сле
дующие параметры качества для поверхностной воды:
9