ГОСТ 31479—2012
удерживаяеготам препаровальнойиглой. Затем срезнакрываютсухой фильтровальнойбумагой и.при
жимая бумагу ребром ладони, наклеивают его на предметное стекло. После того как фильтровальную
бумагуубирают, срездолжен быть неповрежденным.
8.5 Окрашивание срезов
8.5.1 Окрашивание гематоксилин-эозином (общая окраска)
На первом этапе срезы окрашивают квасцовым гематоксилином Эрлиха втечение 3—4 мин ипро
мывают 2 мин в воде. Для удаления избытка гематоксилина срезы опускают в 1%-ный раствор соляной
кислоты (солянокислая вода) до появления розовой окраски, затем в аммиачную воду до появления
синего окрашивания и промывают водой в течение 2 мин. Докрашивают срезы 1%-ном водным раство
ром эозина в течение 1мин иополаскивают водой. Послеэтого срезы заключают подпокровное стекло.
Результаты окраски: в животных тканях ядра клеток темно-синие, цитоплазма принимает различной
интенсивности и оттенка красные тона. В растительных тканях выделяются клеточные оболочки,
цитоплазма светлая.
8.5.2 Окрашивание Суданом III, IV для выявления жира
Срезы выдерживают в 70 %-ном спирте в течение 0,5—1 мин. После помещают в свежепрофи-
льтрованный красящий раствор Судана до 25 мин. Затем ополаскивают в 70 %-ном спирте от 1до 5 с.
Окрашенные таким образом срезы докрашивают гематоксилин-эозином в соответствиис 8.5.1.
Результатокраски: жир — оранжево-красного цвета, ядра клеток — синие, цитоплазма — разные
тона красного цвета.
8.5.3 Окрашивание раствором
Л
юголя для выявления крахмала
На срезы, наклеенныенапредметныестекла, наносятна 1мин несколько капельраствора
Л
юголя,
ополаскивают водой изаключают под покровное стекло в глицерин-желатин. Зерна крахмала приобре
таютсине-черную или буро-чернуюокраску. Интенсивностьокрашивания со временем быстроснижает
ся. исоответствующие препараты не подлежат хранению.
8.6 Заключение срезов под покровное стекло
Длязаключенияокрашенныхсрезовпод покровноестекло применяютглицерин-желатин, при этом
обезвоживание срезов не требуется.
9 Проведение исследования и обработка результатов
9.1 Приготовленные гистологические препараты рассматривают подлюбым световым микроско
пом. Сначала используют плановые объективы — 10-кратный или меньше, а затем объективы с боль
шим увеличением— до 40-кратного. Окуляры применяют с 10- или 15-кратным увеличением. Для
получения достоверных результатов необходимо исследовать не менее чем по 2 среза с каждого из 3
кусочков, отобранныхоткаждого образца.
9.2 На первом этапе исследования используют общие окраски в соответствии с 8.5.1. Начинают
рассматриватьпрепараты, изготовленные изучастков продукта, отличающихсяот общей массы изучае
мого объекта цветом или фактурой. На втором этапе исследования продукта применяют красители в
соответствии с8.5.2 и8.5.3. При проведении анализаследуетучитывать: если размерчастиц компонен
тов продукта меньше или сопоставим с размеромотдельныхживотных клеток, то проведение ихиденти
фикации значительно усложнено или невозможно.
9.3 При проведении идентификации состава анализируемого продукта следует придерживаться
следующей последовательности. В первую очередьоценивают количество исостояние скелетной мус
кулатуры, жировой ткани и элементов соединительной ткани. При этом необходимо учитывать как осо
бенности микроструктуры этих тканевых компонентов, так и степень их измельчения и равномерность
распределения по всей массе образца. На следующем этапе устанавливаютналичие в анализируемой
пробе других мышечных тканей — сердечной игладкой. Скелетная мускулатура млекопитающих и пти цы
дифференцируется на основании локализации клеточных ядер. В дальнейшем устанавливают при
сутствиепокровныхэпителиальныхструктур, атакже плотной соединительнойткани исубпродуктов. На
отдельных срезах сразу же после окрашивания проводится обнаружение присутствия крахмала.
Выявление иидентификациярастительныхкомпонентовпроводятсянатехжесрезах, чтоидля анализа
животных компонентов.
9.4 Одновременно с качественной оценкой состава образца может возникнуть необходимость
установить количествотого или иного компонента. Для этого следуетиспользоватьлибо окуляр-микро
метр, либо прилагаемые ксветовым микроскопам специальные окулярные вставки с нанесенной на них
6