ГОСТ 32293-2013
окружающего воздуха к тестируемому раствору, например за смет увеличения скорости
перемешивания или снижения потребления углекислого газа (С02) путем сокращения начальной
биомассы или продолжительности тестирования.
11.3.5Поверхность, на которой выдерживаются тестовые сосуды, должна получать
непрерывное, однородное флуоресцентное освещение, например «холодный» белый или дневной
свет.
Штаммы водорослей и (или) цианобактерий требуют различных условий освещенности.
Интенсивность света должна быть подобрана с учетом тестируемых видов.
Примеры
1 Для рекомендуемых видов зеленых водорослей выбирают интенсивность света на
уровне тестируемых растворов в диапазоне от 60 до 120 мкЕ м’2 ? 1 в фотосинтетически
аффективном диапазоне длин волн 400 - 700 нм при измерении с использованием
соответствующего рецептора.
2 Anabaena flos-aquae хорошо растут при более низкой интенсивности света и могут
быть повреждены при высокой интенсивности света. Для таких видов должна быть
подобрана средняя интенсивность света в диапазоне от 40 до 60 мкЕм2с ’\ Для
измерительных приборов, откалиброванных в люксах, эквивалентный диапазон от 4440 до
8880люксовдля«холодного»белогосветаприблизительносоответствует
рекомендуемой интенсивности света в диапазоне от 60 до 120 мкЕ м’г-с1.
Интенсивность света поддерживают в пределах ♦ 15% от средней интенсивности света в зоне
инкубации.
11.4Продолжительность тестирования
Продолжительность тестирования обычно составляет 72 ч. Она может быть уменьшена или
увеличена при условии, что все критерии достоверности выполняются.
11.5Измерения и аналитические определения
11.5.1Водорослевая биомасса в каждом тестовом сосуде измеряется как минимум
ежедневно.
11.5.2Измерение биомассы выполняется с помощью микроскопа или электронного
счетчика частиц (количество клеток и (или) биообъем). Альтернативные методы, например поточная
цитометрия, in vitro или in vivo, флюоресценция или оптическая плотность могут использоваться, если в
тестовом диапазоне биомассы может быть продемонстрирована удовлетворительная корреляция с
биомассой.
11.5.3 Величины pH тестируемых растворов измеряют в начале и в конце тестирования.
11.5.4Концентрацию исследуемого вещества в тестируемых растворах необходимо
проанализировать для проверки начальных значений и поддержания необходимых значений во
время тестирования.
11.5.5Если в течение тестирования с низкой и высокой тестируемой концентрацией и
концентрацией, близкой к ожидаемой величине ЕСМ, начальная концентрация исследуемого
вещества изменяется менее чем на 20% от номинального значения, то достаточно проводить
определение концентрации в начале и в конце тестирования.
11.5.6 Определение всех тестируемых концентраций в начале и в конце тестирования
рекомендуется проводить, если маловероятно, что тестируемые концентрации сохранятся в
диапазоне от 80 до 120% от номинальных значений.
11.5.7Для летучих, нестабильных или сильно адсорбирующихся исследуемых веществ
рекомендуется дополнительный отбор проб для анализа в 24-часовые интервалы во время периода
воздействия в целях более точного описания потребления исследуемого вещества. Для таких
веществ необходимо использовать дополнительные параллельные пробы.
11.5.8 Во всех случаях определение концентраций вещества должно только выполняться в
одной из параллельных проб для каждой тестируемой концентрации.
11.5.9Питательная среда, приготовленная специально для анализа концентраций во
время тестирования, должна подвергаться такой же обработке, что и среда, используемая для
тестирования, например, она должна быть инокулирована водорослями и культивироваться в
аналогичных условиях. Если требуется проводить анализ концентрации исследуемого вещества, то
необходимо отделять водоросли от питательной среды. Осаждение водорослей предпочтительно
проводить центрифугированием с низкой центробежной силой.
11.5.10Если концентрация исследуемого вещества сохраняется в пределах ± 20% от
номинальной или начальной концентрации во время тестирования, то анализ результатов
тестирования проводится с использованием номинальных или начальных величин. Если отклонение от
номинальной или начальной величины превышает ± 20%, то анализ результатов должен
основываться на средней геометрической концентрации исследуемого вещества, наблюдаемой во
6