ГОСТ 32293-2013
10 Описание тестирования
10.1Оборудование
10.1.1При тестировании используются сосуды, изготовленные из стекла или другого
химически инертного материала. Оборудование необходимо тщательно промыть. Никакие
органические или неорганические загрязнители не должны влиять на рост водорослей и (или)
цианобактерий или на состав питательной среды.
10.1.2В качестве тестовых сосудов, как правило, используются стеклянные колбы
объемом, достаточным для проведения измерений и обеспечивающим необходимый массовый
перенос углекислого газа (С02) из атмосферы. Объем жидкости должен быть достаточным для
аналитических определений.
10.1.3Может потребоваться:
аппарат для культивирования: рекомендуется использовать емкости, в которых может
поддерживаться выбранная температура инкубации ± 2SC:
оборудование для измерения освещенности: метод измерения интенсивности света, и в
частности тип рецептора (коллектора), может оказать существенное влияние на измеряемую
величину. Рекомендуется проводить измерения с использованием сферического 4тт рецептора,
который реагирует на прямой или отраженный свет от всех углов выше и ниже уровня измерения, или 2тт
рецептора, который реагирует на свет от всех углов выше уровня измерения;
оборудование для измерения водорослевой биомассы: количество клеток водорослей
является наиболее часто используемым показателем-заменителем биомассы. Подсчет клеток
проводится с использованием электронного счетчика частиц или микроскопа.
Другие показатели-заменители могут быть измерены с помощью проточного цитометра,
флуориметра, спектрофотометра или колориметра. Необходимо вычислить коэффициент перевода
количества клеток в сухой вес биомассы. Для проведения значимых измерений для низких
концентраций биомассы с помощью спектрофотометра необходимо использовать кюветы со
световым путем г 4 см.
10.2Выбор видов
10.2.1Возможно использование нескольких видов неприкрепленных водорослей и (или)
цианобактерий. Водорослевые штаммы, подходящие для проведения тестирования, перечислены в
приложении А.
10.2.2Если используются другие виды водорослей и (или) цианобактерий, то в отчете о
проведении тестирования необходимо указать штаммы и (или) их происхождение. Необходимо
убедиться в том, что экспоненциальный рост выбранного вида водорослей может поддерживаться на
протяжении всего тестирования при преобладающих условиях.
10.3Питательная среда
10.3.1При проведении тестирования рекомендуется использовать две аналогичные
питательные среды - ААР и OECD. Составы питательных сред приведены в приложении В.
Начальное значение pH и буферная емкость (регулирующая увеличение pH) у данных сред
различны.
Результаты тестирования могут отличаться в зависимости от используемой питательной среды,
особенно при тестировании диссоциирующих веществ.
10.3.2Модификация питательной среды может быть необходима при исследовании
металлов и комплексообразующих веществ, а также при исследовании различных значений pH.
Использование модифицированной среды должно быть обосновано в отчете о проведении
тестирования.
10.4Начальная концентрация биомассы
Количество биомассы в начале тестирования должно быть одинаковым для всех тестируемых
видов и достаточно низким для того, чтобы наблюдался экспоненциальный рост в течение
инкубационного периода без риска питательного истощения. Начальное количество биомассы не
должно превышать 0,5 мг/л в пересчете на сухой вес. Рекомендуется использовать следующее
начальное количество биомассы:
-Pseudokirchnariella subcapitata: 5 * 103- 104клеток/мл;
-Desmodesmus subspicatus: 2 - 5 к103клеток/мл;
-Navicula pelliculosa: 104клеток/мл;
-Anabaena flos-aquae: 10* клеток/мл;
-Synechococcus loopolionsis: 5 * 10* - 105 клеток/мл.
4