ГОСТ 32293-2013
Окончание таблицы В.З
Питательный элементКонцентрация в основном растворе
Основной раствор 4: бикарбонат
№НСОз50 г/л
Na2Si03-9H20
Основные растворы стерилизуют с помощью мембранной фильтрации (средний диаметр пор 0.2
мкм) или обрабатывают в автоклаве (15 мин при температуре 120°С). Основные растворы хранят в
темноте при температуре 4’С.
Основные растворы 2 и 4 не обрабатывают в автоклаве, их стерилизуют с помощью
мембранной фильтрации.
Питательную среду готовят, добавляя в деионизированную воду соответствующие объемы
основных растворов 1 -4 :
К 500 мл деионизированной воды добавляют:
10 мл основного раствора 1;
1 мл основного раствора 2:
1 мл основного раствора 3;
1 мл основного раствора 4.
Объем раствора доводят до метки 1 л деионизированной водой.
Раствор питательной среды отстаивают в течение необходимого времени для достижения
равновесия с углекислым газом (С02). В случае необходимости в течение нескольких часов через
раствор пропускают стерильный отфильтрованный воздух.
В.З Приготовление среды ЕРА, США
В.3.1 Добавляют 1 мл каждого основного раствора из реагентов 1.1 - 1.7 примерно к 900 мл
дистиллированной или деионизированной воды и затем доводят до метки 1л.
Б.3.2 Основные растворы питательных макроэлементов готовят путем растворения в 500 мл
дистиллированной или деионизированной воды следующих реагентов:
1.1 -N aN 03- 12,750 г,
1.2 - MgCI2-6H20 - 6.082 г,
1.3- СаС!2-2Н20 - 2,205г
1.4 - Основной раствор микроэлементов (Б.3.3);
1.5-MgS047H20 - 7.350 г;
1.6-К2НР04- 0.522 г:
1.7-NaHC03- 7.500 п
1.8 - Na2Si03-9H20.
Для реагентов 1.1 - 1.4 может быть приготовлен один общий раствор.
П р и м е ч а н и е - Реагент 1.8 используют для тестирования с диатомовыми водорослями. Реагент
можно добавлять непосредственно (202.4 мг) или в виде основного раствора таким образом, чтобы в среде
достигалась окончательная концентрация кремния 20 мг/л.
В.3.3 Основной раствор питательных микроэлементов готовят путем растворения в 500 мл
дистиллированной или деионизированной воды следующих реагентов:
2.1 - НзВОз - 92.760 мг;
2.2 - МпС12 4Н20 - 207.690 мг;
2.3-ZnCI2- 1.635 мг;
2.4 - FeCU-6H20 - 79.880 мг;
2.5-СоС12-6Н20 - 0.714 мг;
2.6 - Na2MoO< 2Н20 - 3.630 мг,
2.7 - C
u
CI2-2H20 - 0.006 мг;
2.8 - Na2EDTA-2H20 - 150,000 мг;
2.9 - Na2Se04 5Н20 - 0.005 мг.
П р и м е ч а н и е - Реагент 2.9 используется только для основных культур диатомовых водорослей.
В.3.4 Приводят pH раствора к 7,5 ± 0.1 путем добавления 0.1 н. или 1.0 н. NaOH или HCI.
В.3.5 Среду фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0.22 мкм в стерильный
17