ГОСТ 10444.8—2013
5.2.1.2 Приготовление
Растворяют компоненты или готовую дегидратированную питательную среду в воде, при необ
ходимости подогревают.
Если необходимо, устанавливают уровень pH приготовленной среды (5.2.4) так, чтобы после
стерилизации он соответствовал (7.2 ± 0.2) ед. pH при температуре 25 °С.
Разливают среду по 90 см3в колбы соответствующей вместимости.
Стерилизуют в автоклаве (6.1) в течение 15 мин при температуре 121 °С.
5.2.2 Раствор полимиксина В
5.2.2.1 Состав
Сульфат полимиксина В
........
...........................................106ME
Вода........................................................................................100 см3
5.2.2 2 Приготовление
Растворяют сульфат полимиксина В в воде. Стерилизуют путем фильтрации.
5.2.3 Яично-желточная эмульсия
Используют свежие куриные яйца с неповрежденной скорлупой. Моют яйца жидким моющим
средством, используя щетку. Промывают под проточной водой, погружают в 95 %-иый (по объему)
этиловый спирт на 30 с и высушивают. Соблюдая правила асептики, разбивают каждое яйцо и отде
ляют желток от белка, переливая его несколько раз из одной половинки скорлупы в другую. Помеща ют
желтки в стерильный измерительный цилиндр и добавляют четыре части стерильной воды (по
объему). Переносят, соблюдая правила асептики, в стерильные колбы и энергично перемешивают.
Нагревают смесь на водяной бане (6.4) в течение 2 ч при температуре от 44 °С до 47 °С. Затем
оставляют смесь для образования осадка на 18-24 ч при температуре (5 ± 3) 9С. Собирают надоса-
дочную эмульсию, соблюдая правила асептики.
Срок хранения эмульсии при температуре (5 ± 3) °С - не более 72 ч.
90 см3
1.0 см3
10.0 см3
5.2.4 Готовая среда (MYP агар)
5.2.4.1 Состав
Основа среды (5.2.1)..............................................................
Раствор полимиксина В (5.2.2)...........................................
Яично-желточная эмульсия (5.2.3).....................................
5.24.2 Приготовление
Расплавляют основу среды и охлаждают на водяной бане (6.4) при температуре от 44 *С до 47
°С. Добавляют другие жидкости, хорошо перемешивая после каждого добавления. Охлаждают гото
вую среду на водяной бане (6.4) при температуре от 44 °С до 47 вС.
5.2.5 Приготовление чашек с агаром
Разливают по 15-20 см3готовой среды (5.2.4) в стерильные чашки Петри (6.6) и оставляют для
застывания на горизонтальной поверхности.
Перед подсушкой поверхности питательной среды чашки хранят при температуре 5 4С ± 3 ®Сдо
четырех дней.
Непосредственно перед использованием среду подсушивают, предпочтительно со снятыми
крышками, перевернув их агаровой поверхностью вниз. Подсушивают в сушильном шкафу или инку
баторе (6.2) при температуре от 37 °С до 55 еС до тех пор. пока поверхность агара не станет сухой.
5.2.6 Проверка рабочих характеристик
Проверку рабочих характеристик проводят по ГОСТ ISO 11133-2 (приложение В).
5.3 Агар с бараньей кровью
5.3.1 Кровяная агаровая основа среды
5.3.1.1 Состав
Протеозолептон или эквивалентный пептон.
Печеночный гидролизат....................................
Дрожжевой экстракт.............................................
Хлорид натрия (NaCI)..........................................
Агар..........................................................................
Вода.........................................................................
а’ В зависимости от жвлирующих свойств.
15 г
2.5 г
5 г
5 г
от 12 до 18 г*’
1000 см3
3