ГОСТ 28085-2013
7.7.3При проведении испытаний на ростовые свойства питательных сред для определения
миколлазм в биологических препаратах используют по крайней мере один из видов микоплазм,
указанных в таблице 3. При этом учитывают целевое назначение тест-культур:
- Acholeplasma laidlavvii NCTC 10116. АТСС 23206 (вакцины для ветеринарного применения, в
производстве которых используют антибиотики);
- Mycoplasma gallisepticum NCTC 10115. АТСС 19610 (в случаях, когда при производстве
вакцин используются материалы, имеющие птичье происхождение или для вакцин, применяемых в
птицеводстве);
- Mycoplasma hyorhinis NCTC 10130. АТСС 17981 (вакцины для ветеринарного применения,
кроме птичьих);
- Mycoplasma orale NCTC 10112, АТСС 23714 (вакцины для ветеринарного применения);
- Mycoplasma synoviae NCTC 10124. АТСС 25204 (в случаях, когда для производства вакцин
используются материалы, имеющие птичье происхождение или для вакцин, применяемых в
птицеводстве).
7.7.4Выбранные питательные среды для микоплазм засевают соответствующими тест-
микроорганизмами. На чашку Петри с твердой питательной средой или флакон вместимостью 100
см3, содержащий жидкую питательную среду, вносят не более 100 КОЕ тест-микроорганизма. Для
каждого вида микроорганизма используют отдельные чашки и флаконы. Жидкие среды инкубируют
при температуре от 36 °С до 38 °С; твердые среды инкубируют в микроаэрофильных условиях (в
атмосфере азота, содержащего 5 % - 10 % диоксида углерода) при температуре от 36 °С до 38 °С.
После инкубации проводят пересевы по 0.2 см3 жидкой среды на твердую среду на седьмой,
четырнадцатый и двадцатый день. Твердая среда выдерживает испытание, если наблюдается
адекватный рост каждого тест-микроорганизма. Жидкая среда выдерживает испытание, если
наблюдается адекватный рост пересеянного с нее тест-микроорганизма на чашках Петри с твердой
питательной средой.
7.7.5 Питательные среды должны обеспечивать рост микроорганизмов-контаминантов
биологических препаратов.
7.7.6 Готовые питательные среды, проверенные на ростовые свойства, разливают по 6 - 8
см3(для определения анаэробных микроорганизмов по 10-12 см3в пробирки и по 50 - 60 см3во
флаконы вместимостью 100 см3.
8 Проведение испытания
8.1 Проведение испытания на стерильность инактивированных лекарственных средств
с использованием тиогликолевой среды
8.1.1 Из каждого флакона (ампулы) лекарственного средства проводят посев в количестве,
приведенном в таблице 2. в три пробирки с тиогликолевой средой, три пробирки с жадкой средой
Сабуро и три пробирки с соево-казеиновой средой.
Посевы на жидкой тиотиколевой среде инкубируют при температуре (32,5
±
2.5) °С. а на
жадкой среде Сабуро и жидкой соево-казеиновой среде (независимо от метода посева) при
температуре (22.5
±
2.5) °С. Срок инкубирования - 14 сут. Посевы периодически просматривают.
8.1.2 Наличие роста микроорганизмов определяют визуально. Если в процессе инкубирования
посевов исследуемая проба вызывает помутнение питательной среды, через 5 - 7 сут после начала
испытания не менее 1 см3помутневшей среды переносят в две пробирки с той же стерильной средой.
Инкубируют исходные посевы и пересевы в течении (14 ♦4) сут.
8.1.3 При испытании проб препаратов на стерильность проводят контроль стерильности сред;
три пробирки с каждой средой выдерживают в термостате в течение 14 сут при температуре (32,5
±
2.5 ) ""С. со средой Сабуро - при температуре (22,5
±
2.5) °С.
8.2 Проведение испытания на стерильность лекарственных средств, содержащих
инактивированные микроорганизмы, или микробную и грибную контаминацию лекарственных
средств, содержащих живые микроорганизмы без тиогликолевой среды
8.2.1 Из каждой пробы лекарственного средства проводят посев на жадкие питательные
среды: Сабуро. МПБ и МППБ (среда Китт-Тароцци) и твердые питательные среды: Сабуро и МПА. На
посев используют по три пробирки и две чашки с питательной средой. На среду Китт-Тароцци
делают высевы в две пробирки и два флакона.
8.2.2Длявыявленияаэробныхмикроорганизмовифакультативно-анаэробных
микроорганизмов высевают 0.5 см3посевного материала в одну пробирку и 1 - 2 см3в один флакон, а
для выявления анаэробных микроорганизмов - соответственно по 1 и 5 см3.
9