ГОСТРИСО 20743—2012
Альбумин бычьей сыворотки.......................................................60 мг
Буферный раствор по 6.15..........................................................30 мл (до полного объема)
После растворения реагент должен храниться при комнатной температуре не менее 15 мин перед
применением, а затем быть использован в течение 3 ч.
6.17 АТФ реагент для экстракции
10%-ный водный раствор бензалкония хлорида......................1 мл
Вода..............................................
......
...........................................9 мл
Использование любого другого неспецифичного реагента для экстракции должно быть отражено
в протоколе испытаний.
6.18 АТФ элиминирующий агент
Агент, который уменьшает концентрацию АТФ в питательном бульоне до уровня менее чем
1СГ13моль/л в течение 15 мин.
Апираза (ЕС: 3.6.1.5)....................................................................5 международных единиц
Аденозиндезаминаза (фермент) (ЕС: 3.5.1.4)..........................5 международных единиц
Буферный раствор 0.005 моль/л
натрия фосфорнокислого 2-водного
с содержанием сахарозы.............................................................10 мл (до полного объема)
pH......................................................................................................7.2
±
0.2
Использование любого другого неспецифичного нейтрализующего реагента должно быть отраже
но в протоколе испытаний.
6.19 SCDLP или другая среда для приготовления эталонного раствора АТФ
SCDLP по п. 6.8 или другая среда.............................................. 10 мл
Элиминирующий агент АТФ по 6.18...........................................1 мл
После перемешивания помещают в термостат на 1 ч при температуре от 30 °С до 37 °С для пре
дотвращения микробиологической контаминации.
Затем переносят на 1ч в горячую водяную баню при температуре от 70 °Сдо 90 °С и затем охлаж
дают до комнатной температуры.
Хранят раствор в холодильнике и используют в течение 24 ч после приготовления.
Эталонный раствор АТФ следует готовить в том случае, если добавление нейтрализующих аген
тов вызывает увеличение концентрации АТФ в отмывочном растворе более 10“11 моль/л.
7 Эталонные штаммы
7.1 Штаммы
Следующие штаммы должны использоваться во всех испытаниях антибактериальной активности:
- Staphylococcus aureusАТСС 6538. CIP 4.83. DSM 799. NBRC 13276 или NCIMB 9518;
- Klebsiella pneumoniae АТСС 4352. CIP 104216. DSM 789, NBRC 13277 или NCIMB 10341.
П р и м е ч а н и е — АТСС — обозначение Американской коллекции типовых культур (American Type Culture
Collection) (США): CIP — обозначение коллекции культур Института Пастера (Франция); DSM — обозначение
культур Германской коллекции микроорганизмов и клеточных культур (German Collection of Microorganism and Cell
Cultures) (Германия); NBRC — обозначение культур Центра Nite Биологических ресурсов (Biotogical Resource
Center) (Япония); NCIMB — обозначение культур Национальной коллекции промышленных бактерий (National
Collection of Industrial Bactena) (Великобритания).
По согласованию всех заинтересованных сторон допускается использование эквивалентных
штаммов бактерий вместо вышеприведенных штаммов, которые могут быть получены из Всемирной
Федерации Коллекции Культур [World Federation of Culture Collection (WFCC)]. Штаммы, используемые в
испытаниях, должны фигурировать в документах с обозначением как наименований используемых
штаммов, так и источников их происхождения.
6