ГОСТ Р 55291—2012
для энтерококков.
При необходимости идентификации из выросших колоний готовят препараты, окрашивают по
Граму по 9.1. Энтерококки - грамположительные кокки, расположенные парами, короткими или длин
ными цепочками.
Наличие каталазы определяют по 9.2. Энтерококки каталазу не образуют.
10.4.2 Обработка результатов
Результаты оценивают визуально по каждой анализируемой пробе отдельно.
Если при анализе культуральных и морфологических свойств микроорганизмов обнаружены
грамположительные. не образующие каталазу кокки, то делают заключение о том. что обнаруженные
микроорганизмы относят к энтерококкам.
10.5 Метод выявления осмотолерантных дрожжей и плесневых грибов
10.5.1 Проведение анализа
Для выявления осмотолерантных дрожжей и плесневых грибов в анализируемом пробиотиче
ском препарате {пробиотической кормовой добавке, закваске, молочной сыворотке) анализируемую
пробу или его исходное разведение высевают в соответствии с 8.1 на поверхность одной из предва
рительно подсушенных агаризованных питательных сред по 7.4.6. агаризованной среды для выделе
ния дрожжей по ГОСТ Р 54065 и среды Сабуро.
Посевы инкубируют в течение 7 сут при температуре (24 ± 1) вС. Через трое суток проводят
предварительную оценку результатов инкубирования посевов, а через 7 сут - окончательную.
10.5.2 Обработка результатов
Для определения количества осмотолерантных дрожжей и плесневых грибов выбирают те раз
ведения. при посеве которых на чашках Петри вырастает не менее 15 и не более 150 колоний для
дрожжей и не менее 5 и не более 50 для плесневых грибов.
Колонии осмотолерантных дрожжей и плесневых грибов разделяют визуально.
Рост осмотолерантных дрожжей на агаризованных питательных средах сопровождается обра
зованием выпуклых, блестящих, серовато-белых колоний с гладкой поверхностью и ровным краем.
Рост осмотолерантных плесневых грибов на питательных средах сопровождается появлением
мицелия различной окраски.
10.6 Методы выявления бактерий семейства Entorobactoriaceae
Колиформиые бактерии - грамотрицательные, оксидазоотрицательные, не образующие спор
палочки, способные расти на дифференциальных лактозных средах, ферментирующие лактозу до
кислоты и газа при температуре (37 ± 1) °С в течение 24-48 ч. При микробиологическом контроле
пробиотических препаратов, микробиологических кормовых добавок, можно ограничиваться обнару
жением бактерий из группы кишечной палочки без их биохимической дифференциации.
10.6.1 Проведение анализа
Для выявления колиформных бактерий семейства Enterobacteriaceae в анализируемом препа
рате (пробиотической кормовой добавке, закваске, молочной сыворотке) анализируемую пробу его
исходное разведение высевают в соответствии с 8.1 на поверхность одной из предварительно под
сушенных агаризованных питательных сред по 7.4.1, цитратного агара Симмонса, среды Эндо, мясо-
пептонного агара, висмут-сульфитного агара, агара Плоскирева. агара Левина. Посевы инкубируют
при температуре (37 ± 1) вС в течение (24 ± 3) ч и проводят предварительный учет результатов, окон
чательный учет проводят через (48 ± 3) ч.
Посевы на агаризованных средах после инкубирования просматривают и отмечают рост харак
терных колоний. Они могут быть окрашены в красный цвет с наличием металлического блеска или без
него {лактозоположительные энтеробактерии), бесцветными (лактозоотрицательные), могут при
обретать розоватый или сероватый оттенок с более или менее выраженным темным центром, осо
бенно у более крупных колоний. Диаметр и окраска колоний могут варьировать не только в
зависимости от родовой принадлежности, но и от массивности роста. В среднем диаметр коло
ний составляет 1-2 мм. Представители родов Klebsiella и Enterobacter чаще образуют слизистые ро
зовые колонии диаметром 2-3 мм. Shigella. Salmonella. Hafnia - нероящиеся представители рода про
теев обычно образуют более «нежные» колонии небольших размеров.
На лактозном агаре с бриллиантовым зеленым и феноловым красным колиформные бактерии
образуют ярко-желтые колонии диаметром 2 - 4 мм с желтой прозрачной зоной диаметром 1-3 мм
вокруг колонии.
На среде Эндо колонии бактерий семейства Enterobacteriaceae обычно выпуклые с правильны
ми очертаниями (круга), в разной степени опалесцирующие, иногда слизистые, темно-красные с ме
таллическим блеском или розово-красные без блеска, на агаре Плоскирева - кирпично-красные с
глянцевой поверхностью, на среде Левина - черные с металлическим блеском, темные с черным
центром, темно-фиолетовые или фиолетово-черные с темным центром блестящие колонии. Из коло
ний готовят мазки, окрашивают их по Граму: при микроскопии обнаруживают грамотрицательные па-
Ю