ГОСТ Р 55291—2012
При положительной реакции образуются хлопья, которые не смешиваются в однородную сус
пензию. При отрицательной реакции хлопья не образуются, и суспензия остается гомогенной. Эта
лонным штаммом служит тест-штамм Staphytoccocus aureus.
Э.6.2.2 Пробирочный тест
Засевают изолированную колонию стафилококка в пробирку с 0.5 см3 кроличьей плазмы. Про
бирки с заранее разлитой кроличьей плазмой могут храниться в холодильнике до 10 сут или в замо
роженном состоянии до нескольких месяцев. Инкубируют при температуре 35 °С - 37 °С до 24 ч.
Первое наблюдение проводят через 4 ч инкубации на наличие желе или сгустка, который не
разрушается при легком встряхивании.
Если сгусток появляется через 4 ч. пробирки оставляют до следующего утра при комнатной
температуре, чтобы избежать его растворения за счет стрептокиназолодобной активности анализи
руемой культуры стафилококка.
Если сгусток отсутствует, посевы инкубируют повторно в течение 24 ч и затем анализируют по
вторно.
При наличии патогенных стафилококков наблюдается положительный результат - любое обра
зование сгустка через 4 или 24 ч. При отрицательном результате сгусток не образуется, плазма сво
бодно растекается при наклоне пробирки, то есть патогенные стафилококки отсутствуют.
10 Методы выявления бактерий и грибов
10.1 Метод выявления бактерий рода Proteus
10.1.1 Проведение анализа
Для выявления бактерий рода Proteus в анализируемом пробиотическом препарате (пробиоти
ческой кормовой добавке, закваске, молочной сыворотке) анализируемую пробу или его исходное
разведение высевают в соответствии с 8.1 на поверхность одной из предварительно подсушенных
агаризованных питательных сред: цитратного агара Симмонса, среды Эндо, мясо-пептонного агара по
ГОСТ 29112. висмут-сульфитного агара, агара Плоскирева. агара с эозином и метиленовым голу бым
(агар Левина), лактозного агара с бриллиантовым зеленым и феноловым красным по 7.4.1.
Для получения чистых культур Proteus используют посев по Шукевичу (в конденсационную жид
кость скошенного питательного агара).
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение 24-48 ч. через 24 ч проводят предва
рительный учет результатов, через 48 ч - окончательный.
После инкубирования посевы просматривают и отмечают рост колоний, характерных для бакте
рий рода Proteus.
Бактерии рода Proteus на средах образуют белые роящиеся колонии. На среде Плоскирева об
разуют крупные диаметром 2-3 мм полупрозрачные изолированные колонии правильных очертаний с
желтовато-розоватым оттенком. На висмут-сульфитном агаре через 48 ч культивирования колонии
бактерий рода Proteus имеют грязно-коричневый цвет, а после их снятия на среде остается темно-
коричневая зона.
При необходимости идентификации из выросших колоний готовят препараты, окрашивают по
Граму по 9.1 и делают пробу на каталазу по 9.2. В мазках, окрашенных по Граму, бактерии рода
Proteus имеют форму палочек размером 1,0 - 3.0 к 0.4 - 0.6 мкм; кокковидные или неправильные ин
волюционные форм, грамотрицательные. Клетки могут образовывать пары или цепочки, капсул не
образуют. Все представители рода Proteus каталазоположительные.
10.1.2 Обработка результатов
Результаты оценивают визуально по каждой анализируемой пробе отдельно.
Если при анализе культуральных и морфологических свойств обнаружены каталазоположитель
ные грамположительные микроорганизмы, дающие на пластинчатых средах характерный рост в виде
роящихся колоний, то их относят к бактериям рода Proteus.
10.2 Метод выявления бактерий рода Pseudomonas
10.2.1 Проведение анализа
Для выявления бактерий рода Pseudomonas в анализируемом пробиотическом препарате (про
биотической кормовой добавке, закваске, молочной сыворотке) анализируемую пробу или его
исходное разведение высевают в соответствии с 8.1 на поверхность одной из предварительно
подсушенных агаризованных питательных сред: по 7.4.11. мясо-пептонного агара, агара Плоскирева.
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение 24-48 ч. через 24 ч проводят предва
рительный учет результатов, через 48 ч - окончательный.
После инкубирования посевы просматривают и отмечают рост колоний, характерных для бак
терий рода Pseudomonas.
Бактерии рода Pseudomonas образуют синие или зеленовато-синие или фиолетовые пигменты.
8