ГОСТ ISO 21527-1—2013
5.2.1.2Приготовление
5.2.1.2.1 Общие вопросы
Суспендируют в воде все ингредиенты, кроме хлорамфеникола, идоводятдо кипения для полного
растворения. При необходимости регулируют pH так. чтобы после стерилизации он был равен 5.6 ± 0.2
при температуре 25 °С.
Добавляют 10 см31 %-ного раствора хлорамфеникола (массовая концентрация) в этаноле и пере
мешивают. Распределяют среду в большом количестве в удобные контейнеры (6.5) подходящей емкос
ти. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин.
Затем среду немедленно охлаждают в водяной бане (6.3). поддерживаемой при температуре от
44 °С до 47 °С. Охлаждают до температуры ниже 50 °С и распределяют в объеме по 15 см3 в стерильные
чашки Петри (6.6).
Оставляют среду до затвердевания и, при необходимости, сушат поверхностьчашек, как описано в
ISO 7218 и ISO/TS 11133-1 и ISO/TS 11133-2.
Среды используют немедленно или хранят в темноте согласно ISO/TS 11133-1 и ISO/TS 11133-2.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ! Следует избегать воздействия света на среду, поскольку в результа
те недооценки микрофлоры в образцах могут быть образованы цитотоксические продукты
распада.
5.2.1.2.2 Факультативное добавление гидрохлорида хлортетрациклина
Если возникают сложности из-за чрезмерного бактериального роста (например, при использова
нии сырого мяса), рекомендуется использовать хлорамфеникол (50 мг/дм3) и хлортетрациклин
(50 мг/дм3). В этом случае приготовляют среду, как описано выше, только с использованием 50 мг хлор
амфеникола. распределяют ее в объеме по 100 см3 истерилизуют. Готовят также раствор 0.1 %-ного
гид рохлорида хлортетрациклина (массовая концентрация) в воде (будучи относительно неустойчивым
в растворе, ондолжен быть свежеприготовленным) истерилизуют фильтрацией. Непосредственно перед
использованием добавляют 5 см3этого раствора асептически к 100 см3основной среды и разливают в
чашки. Использование гентамицина не рекомендуется, так как согласно представленным данным он
вызывает ингибирование некоторых видов дрожжевых грибов.
5.2.1.2.3 Факультативное добавление микроэлементов
Для идентификации плесневых грибов на среде DRBC перед обработкой в автоклаве добавляют
раствор следующих микроэлементов в объеме 1 см3 на литр среды: ZnS04■7Н,0 — 1 г;
CuS04-5Н20 — 0,5 г, вода, дистиллированная или деионизированная, — 100 см3(1).
5.2.1.2.4 Факультативное добавление тергитола
Для предотвращения чрезмерного роста микроорганизма Mucoraceae на агаровых пластинах ре
комендуется добавление к культуральной среде тергитола (1 см3/дм3).
5.2.1.3Испытание рабочих характеристик для гарантии качества питательной среды
5.2.1.3.1 Общие вопросы
DRBC является твердой средой. Продуктивность и селективность — по ИСО/ТУ 11133 (все части)
со следующими техническими условиями.
5.2.1.3.2 Продуктивность
Инкубация:
5 дней при (25
1
1) °С.
Штаммы:
Saccharomyces cerevisiae АТСС 9763
Candida albicans АТСС 10231
Aspergillus niger АТСС 16404
Mucor racemosus АТСС 42647,
или штаммы, зарегистрированные как эквивалентные в других грибковых семействах.
Эталонные среды:
партия сред SDA(декстрозный агар Сабуро), уже валидированных.
Контрольный метод:
количественный.
Критерии:
коэффициент продуктивности. Р„ 2: 0,5.
Характерная реакция:
характерные колонии/пропагулы/зародыши согласно каждому виду.
4