ГОСТ 31748— 2012
Для определения точной концентрации афлатоксина в каждом исходном растворе регистрируют
спектрпоглощения при длинах волнот330до 370нм вкварцевыхкюветахтолщиной 1см (5.7), используя
спектрометр (5.6).
Рассчитывают концентрацию каждогоафлатоксина р„ мкг/см3,используя уравнение (1):
А *-. /*’1 0 0 ,0(1)
t,d
где — оптическая плотность, определяемая в максимуме спектра поглощения:
М
—
молекулярная масса каждогоафлатоксина, г/моль;
к
,
—
коэффициент молярного поглощения каждого афлатоксина в смеси толуол/ацетонитрил.
П р и м е ч а н и е — Это значение определено для раствора, который содержит с = 1 моль/дм
3
афлатоксина
и находится в кюветах с длиной оптического пути
д
-
1 см. Коэффициент молярного поглощения (к) применяют без
единиц измерения, допускается применять уравнение
А
-
г
.
с д
.
ему соответствует единица измерений.
дм
3
-моль
-1
см"’;
е
d
— длина оптического пути кюветы, см.
М
м
, приведены втаблице 1.
Т а б л и ц а 1 — Молекулярные массы и коэффициенты молярного поглощения афлатоксинов В>. В*. Gi и G
2
Л ф
ПВтоксин
Л*.
Г/МОПЬ
в-
В
2
Q,
с г
31219300
31420400
32816600
33017900
П р и м е ч а н и е — В качестве растворителя используется смесь толуола и ацетонитрила (4.8).
4.13 Основной стандартный раствор смеси афлатоксинов
Готовят исходный раствор, содержащий 500 иг/см3афлатоксина В,, 125 нг/см3афлатоксина В2,
250 нг/см3афлатоксинаG, и 125 нг/см3афлатоксинаG2в смеси толуол/ацетонитрил (4.8). При необходи
мости хранения раствора взвешивают колбу. Колбу плотно оборачивают алюминиевой фольгой и хра
нят при температуре около 4 X . Непосредственно перед использованием колбу взвешивают снова и
отмечаютлюбые изменения в массе после хранения.
П р и м е ч а н и е — Обычное воздействие УФ излучения во время измерения оптической плотности не при
водит к заметной конверсии с образованием продуктов фотолиза.
4.14 Градуировочный раствор смеси афлатоксинов
Каждую порцию основногосандартного раствора смеси афлатоксинов (4.13), какэто указано втаб
лице 2, переносят в четыре мерные колбы вместимостью 2
см
3(5.5). Растворы выпаривают до сухого
остатка в токе азота при комнатной температуре. В каждую колбу добавляют 1см3метанола (4.6). Рас
творяют внем сухой остаток, разбавляют раствордо метки водой (4.1) иперемешивают. Растворы гото
вят непосредственно вдень использования.
Т а б л и ц а 2 — Приготовление стандартных растворов
Стандартный
раствор
о т о б р а н н ы й и з
ИСХОДНОГО
раствора, мил
Объем,Концентрация афлатоксина. Hr/CMJ
в,
G.
1
60
15.03,75
7.503.75
2
40
10.02,50
5.002.50
3
20
5,001.25
2.501.25
4
10
2,500.625
1.250.625
П р и м е ч а н и е — Указанные значения приведены в качестве ориентиров.
То
чны
е
з
н
а
ч
е
ния
массово
й
к
о
нц
е
н
тра
ции
растворов в
ычи
с
ляю
т
и
с
х
од
я
из значений,
расс
чи
та
нных
п
о форм
ул
е
(1)
—
см
.
4
.
12
.
4.15 Серная кислота, по ГОСТ4204. раствор c(H_SOJ = 2 моль/длг3.
3