ГОСТ 31748— 2012
регистрирующий прибор с ленточной диаграммой, настраиваютрегулировкуфлуоресцентного детекто
ратаким образом, чтобы получитьдля0.125 нгафл атоксина G, в50мкл от 30 %до40 %шкалы
р
е
г
и
стр
и
р
ующ
е
го
п
р
и
бора
.
6.5 Идентификация
Проводят идентификацию кахщого пикаафлатоксина на хроматограммеобразца путемсравнения
значений времениудерживания со значениями соответствующих стандартов.
Афлатоксины можно идентифицировать одновременным вводом раствора испытуемой пробы и
градуировочных растворов. Кроме того, при идентификации помогает исчезновение пиков афлатокси-
нов В, и G, в случае, когда не проводитсядобавка реагента для дориватизации.
6.6
П
остро
е
ни
е
град
уи
рово
чн
о
й
зав
и
с
и
мост
и
Для каждого афлатоксина строят градуировочную зависимость путем ввода 50 мкл стандартных
растворов 1.2.3 и 4 (см. таблицу 2). Проверяют линейность зависимости
[4]
.
6.7 Определение
Количественное определение проводится методом внешнего стандарта с интегрированием пло
щади пика или измерением высоты пика, которыедалее соотносятся с соответствующими значениями
для стандарта.
В петлю инжектора вводят 50 мкл стандартного раствора в соответствии синструкциями произво
дителя инжектора. Афлатоксины элюируют в порядке G2,G,.В2и В, с временем удерживания приблизи
тельно 6. 8, 9 и 11 мин соответственно. Пики должны быть разделены до базовой линии. При
необходимости регулируют значения времени удерживания путем изменения концентрации метанола
подвижной фазы (4.11).
Вводят 50 мкл (У6)очищенного экстракта образца (см. 6.3)в инжекторную петлю.
7
Обработ
к
а
результатов
Рассчитываютмассу
т г
г.анализируемойпробы, присутствующей во фракции второго фильтрата,
взятогодля IA колонки (У4), поформуле
т,= то
v
.
v
’
<
2
>
где
т 0
— масса пробы образца (см. 6.2), г (т 0= 25 г);
У, — общий объем первого фильтрата (см. 6.2), см3(У, = 125 сл#3)’>;
У2— объем фракции первого фильтрата (см. 6.2), взятыйдля разбавления,
см1
(У2= 15 см3);
У3— общий объем второго фильтрата (см. 6.2). см3(У3= 45 см3);
У4— объем фракции второго фильтрата (см. 6.3), см3(У4= 15см3).
Рассчитывают массовую долю каждого афлатоксина. w„ в микрограммах на килограмм пробы,
вычисляют поформуле 3 (метод внешнего стандарта)
(3)
У*
т
.
где У5— объем элюата (6.3), мкл (У5= 2000 мкл);
У6— объем очищенного и введенного экстракта образца (6.7), мкл (У6= 50 мкл);
масса
да
нн
ого
афлатоксина, присутствующего в введенном объеме, соответствующая изме
ренной площади пика или высоте пика, определяемая по градуировочной характеристике, в
нанограммах;
т , — масса
а
н
а
ли
з
и
р
у
е
мо
й
пробы, г, соответствующей фракции второго фильтрата, взятого для
IA колонки (У4)(см. формулу (2)).
Для получения массовойдоли суммы афлатоксиновсуммируют массовыедоли четырехафлаток-
синов.
" Принимая во внимание данные по точности метода. У, может рассматриваться как эквивалент объема
растворителя экстракции.
6