Приложение А
(рекомендуемое)
ГОСТ 31716—2012
Правила надлежащей лабораторной практики (GLP) для выполнения
ферментативного анализа пищевых продуктов
А.1 Введение
Рекомендуемые правила GLP для выполнения ферментативного анализа менее известны, чем правила
выполнения других химических анализов. Для получения результатов, имеющих удовлетворительные достовер
ность и точность, необходимо принять ао внимание приведенные чиже правила GLP.
А.2 Реактивы
А.2.1 Следует использовать ферменты только установленного качества (удельной активности, специфич
ности действия, концентрации, отсутствие загрязнителей с ферментативной активностью, растворители).
А.2.2 Следует использовать хоферменты только установленного качества (степени чистоты, кислотной или
солевой формы, отсутствие загрязнителей).
А.2.3 Все реактивы, помимо ферментов и коферментов. должны быть аналитической степени чистоты.
А.2.4 Вода для приготовления растворов ферментов идругих реактивов должна быть бидистиллированной.
полученной в стеклянном оборудовании.
А.2.5 Вода для приготовления растворов пробы должна быть дистиллированной, полученной в стеклянном
оборудовании, или деионизированной.
А.2.6 Реактивы и суспензии/растворы ферментов следует хранить в соответствии с инструкциями (обычно
при температуре от 2 ‘С до 8 *С).
А.2.7 Не следует замораживать суспензии ферментов.
А.2.8 Поистечениисрока хранения качествореактивов проверяютпутем исследования стандартных раство
ров с различным количеством анализируемого вещества. Изменения полученных значений оптической плотности
должны быть пропорциональны изменениям концентраций анализируемых веществ.
А.2.9 Температура буферных растворов, взятых из холодильника, перед добавлением в анализируемую
пробудолжна быть доведена до комнатной.
А.З Фотометрические и спектрофотометрические кюветы
А.3.1 Используют стеклянные или пластиковые кюветы сдлиной оптического пути 1см.
П р и м е ч а н и е — Пластиковыекюветы имеютследующие преимущества посравнениюсостеклянными:
a) ниже стоимость (одноразовое применение);
b
) возможно проведение большего числа анализов;
c) в рамках одной партии пластиковые кюветы удовлетворительно подходят сточки зрения измерений опти
ческой плотности.
А.3.2 В тех случаях, когда используется новая партия кювет, необходимо проверить их длину оптического
пути по сравнению сдлиной прецизионных кювет (например, кварцевой кюветы)следующим образом.
Прецизионную кювету и пластиковые кюветы наполняют дистиллированной водой и измеряют оптическую
плотность (А,) воды в каждой кювете по сравнению с водой, находящейся в прецизионной кювете. После ополаски
вания кюветы заполняют раствором НАДН (приблизительно 0.15 мг/см3) и повторно измеряют оптическую плот
ность (А2) по сравнению с водой, находящейся в прецизионной кювете. Рассчитывают
А2
- А* для прецизионной
кюветы ипластиковых кювет. Если разница (А2- А.) междудвумя видами кювет превышает 0.5 % значения измере
ния фактической оптической плотности для прецизионной кюветы, рассчитывают средний процент разницы и учи
тывают его для длины оптического пути /а формуле (5).
А.3.3 Всегда используют кюветы чистые и без царапин. Просушивают или очищают оптические стороны
кюветы, используя только мягкую ткань.
А.3.4 Нерекомендуется измерятьоптическую плотность кюветс пробой для испытаний по сравнениюс плот
ностью кюветы для контрольногоопределения, так какие будет получено никакой информации относительно опти
ческой плотности самого контрольного определения Оптическую плотность пробы и контрольного определения
измеряютотносительно воды и рассчитывают разницу.
А.3.5 Не следует измерять оптическую плотность пробы или контрольного определения относительно пус
той кюветы (из-за диффузии света).
А.3.6 Перемешиваютсодержимое кюветы при помощи пластикового шпателя или плотно закрывают кювету
и совершают легкие круговыедвижения.
А.3.7 Удаляют пузырьки воздуха со стенок кювет посредством пластикового шпателя. Следует избегать
нанесения царапин на оптическую сторону кюветы.
7