ГОСТ 31776—2012
Допускается использованиедругих реактивов по качеству и чистоте не ниже вышеуказанных
6.7.2 Подготовка киспытанию
6.7.2.1 Приготовление 5 %-ногораствора хлористого алюминия в 60 %-ном этаноле
В конической колбе вместимостью 250см3по ГОСТ 25336 взвешивают(5.000 ± 0.001) г хлористого
алюминия, растворяют в (50.0 ± 0.5) г 60 %-ного этанола, массу раствора доводят до (100.00
1
0,01) г 60
%-ным этанолом и тщательноперемешивают. Срокхранения раствора — не болееодного года.
6.7.2.2 Приготовление раствора ГСО рутина (0.050 10,001) г ГСО рутина взвешивают, количест
веннопереносят вмерную колбувместимостью 50 см3поГОСТ 1770, добавляют40см360 %-ногоэтано
ла. нагревают до 50 °С—60 °С и выдерживают до полного растворения рутина. Затем охлаждают до
комнатной температуры, доводятдо метки 60 %-ным этанолом и тщательно перемешивают.
6.7.2.3 Построение калибровочногографика
В две мерные колбы вместимостью 25см3поГОСТ 1770дозатором вносят по0,2 (0.4:0.6:0,8.1.0 и
1.2) см3раствора рутинапо6.7.2.2 сконцентрацией 1мг/см3;воднуколбудобавляют4 см3раствора хло
ристого алюминия по 6.7.2.1 (рабочий раствор), доводятдо метки обе колбы 60 %-ным этанолом и
тща тельно перемешивают. Через30 мин измеряютоптическую плотностьрабочих растворов
относительно растворовсравнения (рутин безхлористогоалюминия)в интервале 390—420 нмнадлине
волны макси мума поглощения в кюветахс толщиной оптического слоя 1см.
При построении калибровочного графика на оси абсцисс откладывают количество рутина в мил
лиграммах. содержащегося в 25 см3рабочего раствора, а по оси ординат — максимальное значение
оптической плотности в указанном диапазоне.
Калибровочный графикдолжен бытьлинейным и проходить через началокоординат.
6.7.2.4 Подготовка пробы
(1,000 Ю.001) г измельченной перги взвешивают в конической колбе вместимостью 100 см3 по
ГОСТ25336. добавляют (30.0 10.5)см3 60 %-ного этанола, колбуприсоединяют кобратномухолодиль
нику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин, периодически встряхивая для смывания
частиц перги со стенок. Надосадочную жидкость фильтруютв мерную колбу вместимостью 100 см3 так,
чтобы частицы перги не попали на фильтр.
Экстракцию флавоноидовповторяютещедважды вописанных вышеусловиях, прибавляя костат
ку по (30,0 ♦0.1) см360 %-ного этанола. Фильтраты объединяют, охлаждаютдо (201 3) °С идоводятдо
метки (100.00
1
0.01) см360 %-ным этанолом.
6.7.3 Проведение испытаний
В две мерные колбы вместимостью 25 см3 дозатором вносят по (5,00 10.01) см3 экстракта по
6.7.2.4. Воднуколбу(анализируемый раствор) добавляют(4.0
1
0,1) см3растворахлористогоалюминия
по 6.7.2.1, обе колбы доводятдо метки 60 %-ным этанолом и тщательно перемешивают. Через 30 мин
измеряютоптическую плотностьанализируемого раствора относительно раствора сравнения (экстракт
безхлористогоалюминия) винтервале 390—420 нм надлине волны максимумапоглощения в кюветахс
толщиной оптического слоя 1см.
Покалибровочномуграфику, зная оптическую плотностьанализируемого раствора, находят коли
чество рутина в миллиграммах в 25 см3раствора.
6.7.4 Обработка и представление результатов испытаний
Массовую долю флавоноидов в пересчете на рутин (X,). %. вычисляютпо формуле
х
_ С 100 100100(2)
1~
т
5
1000
(100
-w )
где С — количество рутина в 25 см3,найденное по калибровочному графику, мг;
100 — объем экстракта, см3;
100 — пересчет в %;
т — масса перги, взятойдля анализа, г;
5 — объем экстракта, взятогодля анализа, см3:
1000 — перевод миллиграммов в г;
юо_
(100
---------------пересчет на абсолютно сухое вещество.
-w )
Вычисления проводят с записью результатадо второгодесятичного знака.
За окончательныйрозультатопределения принимают среднеарифметическое значениерезульта
товдвух параллельных измерений с точностью до первогодесятичного знака.
9