ГОСТ Р 52842—2007
Результаты оцениваютсиспользованиемстандартныхстатистическихметодоврасчетаповторяе
мости. При применении стандартных коммерческих наборов на основе микропланшетдля стандартов и
образцов используют, какминимум, двойные повторности (дубли).
4.1.5.2 Оценка экспериментальныхданных
Под пределом обнаружения обычно понимается концентрация, при которой показатель результа
та анализа образца достоверно отличается от показателя результата отрицательного контрольного
образца. Для статистической оценки исключительно важно иметьустановленный приемлемый довери
тельный интервал метода в ходе исследования. Общепринятым минимальным доверительным интер
валом является уровеньдостоверности 95 %.Тем не менее, для достижениядаже этого минимального
уровня достоверности необходимо провести тщательный анализ достаточно большого числа повтор
ностей для каждой концентрации. В зависимости от предполагаемой цели анализа допускается
использовать иболее практичный подход.
В качественном методе показатель результата обычно сравнивают с точкой скрининга, получен
ной прииспытанияхотрицательныхилиположительныхконтрольныхобразцов. Точкискрининга (напри
мер. пороговая величина или контрольный стандарт/отметка) могут быть даны изготовителем
тестового набора или представлены как внутренний контрольный то ст или внешний контрольный
калибратор. Они или рассчитываются, или выполнены таким образом, чтобы отрицательный результат
отличалсяотположительногонеменеечем надваилитристандартныхотклонения.Сэтой цельюпроиз
водители тестовых наборов иногда предоставляютдля испытаний отрицательные или положительные
контрольныеобразцы, содержащиеопределенноеколичествоаналита(ов),определяемого(ых)данным
методом. Как правило, выбирают концентрацию, соответствующую регламентируемой величине
(например. ПДК). Используя контрольные образцы, показатель результата образца сравниваютс поро
говой величиной или контрольным значением иопределяют, содержит ли анализируемый образец кон
центрацию. аналогичную или превышающуюсодержащуюся в положительном контрольном образце.
Для анализаданныхкачественного метода рекомендуетсяпредставление результатов в виде гра
фика. где наосиX нанесены концентрации определяемоговещества,а по осиY — процент положитель
ных результатов (кривая концентрация/показатель). Выбор линейной или логарифмической размер
ности шкалы X зависит от интервала исследуемых концентраций. Логарифмическая шкала более пред
почтительна. если кратность интервала более 100.
Для количественного метода выстраивается стандартная кривая, с помощьюкоторойопределяют
концентрацию аналита в образце, где ось X представляет собой шкалу концентрации определяемого
вещества, ось Y — шкалусоответствующихданных, например, оптической плотности, флюоресценции
илирадиоактивности. Выборлинейнойил и логарифмической размерности шкалыX зависитотинтерва
ла исследуемыхконцентраций. Логарифмическаяшкала более предпочтительна, есликратностьинтер
вала более 100. В этом случае строится полулогарифмическая кривая. Полулогарифмическая кривая
иммунологическогометодаимеет, как правило, сигмовиднуюформуй неможетбытьописаналинейным
уравнением. Несмотря на существование множества математических методов, пригодных для описа
ния калибровочных кривых иммунологических методов, для иммуноферментного метода, например,
общепринятым является использование четырехкомпонентной логистической модели и метода наи
меньшихквадратов. Оба методадаютсравнительно близкиерезультаты ипоменьшей мереодин изних
включен в большинствопрограмм обработкиданных иммунологическихметодов.
В количественном методе точность оценки в значительной мере определяется расположением
обнаруженной величины оптической плотности (флюоресценции или радиоактивности) на калибровоч
ной кривой. Интервал измерения калибровочного графика соответствует максимально приближенной к
линии части сигмовидной кривой (если концентрация выстроена пологарифмической шкале).
4.2Экспериментальные параметры
4.2.1 Процент ложноположительных и ложноотрицательных результатов
В зависимости от области применения исследуемого качественного метода может бытьдостаточ
ноопределениявероятностиложноположительных иложноотрицательныхрезультатов. Исследование
вероятности ложноположительных результатов включает n-кратное исследование «отрицательного
молока» (см. 4.1.1) или других отрицательных образцов, соответствующих предполагаемой области
примененияметода.Числоисследованийтакжезависитот предполагаемой области применения мето
да. Например, для определения показателя 90 %отрицательных результатов с вероятностью 95 %
необходимо проанализировать неменее 60образцов.
Вероятностьложиоотрицательных результатов можетбытьполученас помощью кривой содержа-
ние/сигнал для ряда исследуемых концентраций. Если требуется определить достоверность, оценку
проводят согласно процедуре, приведеннойдля оценки ложноположительных результатовпри опреде
ленной концентрации (например, предел обнаружения или ПДК).
5