ГОСТ Р 53665—2009
колонии розовые с темным розовым центром (H2S — отрицательные бактерии рода Salmonella,
например S. paratyphi А,
колонии желтые с почернением или без него (лактозоположительные бактерии рода Salmonella);
- на среде Эндо— колонии бесцветные или слегка розоватые;
- на среде Плоскирева — колонии бесцветные прозрачные, но более плотные, чем насреде Эндо;
- на висмут-сульфит агаре:
колонии черные с характерным металлическим блеском (например. S. typhi) с пигментированием
среды под колониями,
колонии зеленоватые с темно-зеленым ободком или бесцветные без пигментирования среды под
колониями;
- на средеЛевина — колонии прозрачные, слабо-розовые или розово-фиолетовые;
- на бриллиантовом зеленом агаре:
колонии красноватые или розовые, почти белые (их цвет зависит от штамма и срока инкубирова
ния),
колонии зеленоватые, окруженные яркой желто-зеленой зоной (лактозоположительные и сахаро
зоположительные штаммы).
8.3.3 При использовании других дифференциально-диагностических сред (см. 7.4.36) для выяв
ления бактерийрода Salmonellaособенностироста ихарактеристикиколонийописываютсяв инструкци
ях поих применению.
8.3.4 При отсутствии типичных или не совсем типичных (подозрительных колоний) в посевах на
дифференциально-диагностическихсредахработуспосевамипрекращают иконечныйрезультатопре
деляют какотсутствие бактерий рода Salmonella в анализируемой навеске (массе, объеме) продукта.
8.3.5 При наличии хотя бы на одной дифференциально-диагностической агаризованной среде
колонийтипичныхили не совсемтипичных(подозрительныхколоний) для бактерийродаSalmonellaпро
водят отбор колонийдля дальнейших исследований.
8.4Идентификация бактерий рода Salmonella
Для идентификации бактерий рода Salmonella допускается использование наборов тест-систем
(см. 7.3.12) промышленного производства, разрешенных и зарегистрированных в Российской Федера
ции. Идентификация с использованием наборов тест-систем для идентификации микроорганизмов
основана на использовании стандартныхбиохимических микротестов. Системы используют поинструк
ции производителя со специальной адаптированной под микротесты базой данных (см. 7.3.12).
Для подтверждения идентификации бактерий рода Salmonella допускается использование
латекс-тестов [7].
Для проведения идентификациибактерий рода Salmonellaпобиохимическим свойствам исероло
гическим реакциям используют только чистые культуры.
8.4.1 Отбор и подготовка колоний к идентификации по биохимическим свойствам и сероло
гическим реакциям
С каждой чашки Петри, с дифференциально-диагностической агаризованной среды (см. 8.3.2)
отбираютсначала одну колонию, типичную или не совсем типичную (подозрительную), и затем четыре
колонии, если первая отрицательная.
Рекомендуетсябратьсразу пятьколонийдля идентификации в случае эпидемиологической ситуа
ции. При наличии в одной чашке Петри менее пяти типичных или не совсем типичных(подозрительных)
колоний отбирают все типичные или подозрительные колонии.
Отбор материала проводят бактериальной петлей с поверхности и центра колонии, не касаясь
поверхности среды. Отобранные колонии переносят в чашки Петри на поверхность предварительно
подсушенногомясо-пептонногоагара (см. 7.4.31). ГРМ-arapa (см. 7.4.35)или на скошенную поверхность
мясо-пептонного агара в пробирках (см. 7.4.19).
Чашки Петри или пробиркис посевамиинкубируютпри температуре(3711)вСвтечение(24 ±3)ч.
8.4.2 Окраска по Граму
Из колоний, отобранныхдлябиохимическойидентификации, готовятмазки иокрашивают поГраму
по ГОСТ Р ИСО 7218. Бактерии рода Salmonella — грамотрицательные палочки с закругленными кон
цами.
При использовании в исследованиях тест-наборов для биохимической идентификации бактерий
рода Salmonella окрашивание по Граму не обязательно.
8.4.3 Определение биохимических свойств культуры
Биохимичоские свойства у отобранных и предварительно пересеянных грамотрицательных куль
турпо8.4.1 определяютпоспособностиферментацииглюкозы, сахарозы и маннита, расщепления моче
вины, образования ацетоина, индола, р-галактозидазы. L-лизиндекарбоксилазы.
6