ГОСТ Р 53665—2009
Культуры засевают штрихом по поверхности скошенной среды в пробирках. Посевы инкубируют
при температуре (37 ± 1) °С в течение (24 * 3)ч. периодически наблюдая за посевами (для уреазополо-
жительныхбактерий реакция часто становится видимой уже после 2 ч инкубирования).
Агар Кристенсена
Изменение цвета фенолового красного от розовогодо светло-вишневого свидетельствует о рас
щеплении мочевины с выделением аммония — положительная реакция.
Отсутствие изменения окраски — отрицательная реакция.
Агартройной сахарный
Восстановлениеизменившегося цвета среды при расщепленииглюкозы с красногоили желтогодо
бледно-розового цвета свидетельствуето расщеплении мочевины — положительная реакция.
Отсутствие изменения окраски — отрицательная реакция.
Бактерии рода Salmonella мочевинуне расщепляют.
8.4.3.5 Определениеобразования индола
Для определения образования индола проводят посев в пробирку, содержащую 5 см3одной из
питательных сред: 1 %-иую пептонную воду (см. 7.4.33). бульон Хоттингера (см. 7.4.16) или в трип-
тон-триптофановую среду (см. 7.4.20). Посевы инкубируют при температуре (37 ±1) °С в течение
(24 ±1)ч.
Пептонная вода
В пробиркиссуточной культурой впептонной воде постенкедобавляют 1см3,покаплям, одного из
реактивов: Эрлиха (см. 7.3.5) или Ковача (см. 7.3.6).
Среактивом Эрлиха при наличии индолане позднеечемчерез 5мин впограничном слоеобразует
ся ярко-красное кольцо — положительная реакция. Кольцо остается светло-желтого цвета — отрица
тельная реакция.
Среактивом Ковачарезультаты учитываютчерез 10мин послевзбалтывания. Реактивподнимает
ся на поверхность среды ипри наличии индола окрашивается в темно-красный цвет — положительная
реакция.
Бульон Хоттингера. триптон-триптофановая среда
В пробирки с суточной культурой в бульоне Хоттингера (см. 7.3.16) или трилтон-триптофановой
среде(см. 7.3.20)постенкедобавляют 1см3,покаплям,одного изреактивов: Эрлиха(см. 7.3.5) или Кова
ча по 7.3.6.
Не позднее чем через 5 мин образование темно-красного кольца указывает на образование индо
ла — реакция положительная: коричнево-желтое кольцо — реакция отрицательная.
Бактерии рода Salmonella индола не образуют.
8.4.3.6 Определение образования ацетоина (реакция Фогес-Проскауера)
Для определения способности к образованию ацетоина испытуемую культуру петлей засевают в
пробирки с3 см3 мясо-пептонного бульона с глюкозой (см. 7.4.32) или VP среды (см. 7.4.34).
Посевы инкубируютпри температуре (37 ♦ 1)°С в течение (24 ±3)ч. После инкубации к 1см3отоб
ранной встерильную пробиркукультуральнойжидкостиприбавляютдве капли растворакреатина моно
гидрата. три капли спиртового раствора 1-нафтола и две капли раствора гидроокиси калия,
приготовленные по 7.3.4. Содержимое пробирки перемешивают после прибавления каждого реактива.
Появление через 15 мин от розового до светло-красного окрашивания указывает на положительную
реакцию. При отрицательной реакции остаток культуральной жидкости инкубируютеще (24 ± 3) ч итест
повторяют.
Определение образования ацетоина допускается проводить без применения раствора креатина.
Для этого после инкубирования к 1см3 отобранной культуральной жидкости прибавляюттолько 0.6 см3
раствора 1-нафтола и 0,2 см3раствора гидроокисикалия. Послеприбавления каждогореактива пробир
кувстряхивают. Появление розового окрашивания через 15 мин указывает на положительную реакцию.
При отрицательной реакции остаток культуральной жидкости инкубируют еще (24 ± 3) ч и тест
повторяют.
Бактерии рода Salmonella не образуют ацетоина (реакция Фогес-Проскауера отрицательная).
8.4.3.7 Определение образования L-лизиндекарбоксилазы
Для определения образования L-лизиндекарбоксилазы используют L-лизиндекарбоксилазную
среду (см. 7.4.27).
Жидкую L-лизиндекарбоксилазнуюсредуинокулируютснизубактериальной культуройиинкубиру
ют при температуре (37 ± 1)°С в течение (24 ± 3)ч.
Помутнение и пурпурный цвет среды после инкубирования — положительная реакция.
Желтый цвет среды — отрицательная реакция.
8