ГОСТ Р 53665—2009
(25 ± 0.1) г пробы на (225.0 ± 0.1) см3 среды. Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) 4С в течение
(18 ±2)ч.
8.1.3Вслучае, если массапробыдругая, чем (25 ± 1)г,соотношениемежду количеством высевае
мого продукта и количеством неселективной среды 1:10.
В случае, если исследуют больше одной пробы от определенного продукта и когда очевидно, что
объединенная навеска не влияет на результат испытания, то для уменьшения объема работы навески
объединяют, соблюдая при посеве соотношение между массой общей навески иколичеством неселек
тивной среды 1:10.
8.2 Селективное обогащение
8.2.1 Культуры из среды для предварительного неселективного обогащения по 8.1 пересевают в
две среды для селективного обогащения.
Для этого 0.1 см3культуры, полученной по 8.1.2, пересевают в (10,0 ± 0.1) см3среды Раппапор-
та-Вассилиадиса с соей (RVS-бульон) (см. 7.4.6) и 1.0 см3культуры, полученной по 8.1.2, пересевают в
(10.0 i 0.1) см3в одну из сред: тетратионатный бульон (Мюллер-Кауфмана) (см. 7.4.3), селенитовую
обогатительную (см. 7.4.2), селенит-цистиновый накопительный бульон (см. 7.4.4), магниевую
(см. 7.4.5). модифицированную полужидкую среду MSRV (см. 7.4.7) или другую среду для селективного
обогащения (см. 7.4.36).
Посевы на RVS-бульоне инкубируют при температуре (41.5 ± 1.0) °С в течение (24 ± 3)ч.
Посевы на тетратионатном бульоне (Мюллер-Кауфмана), магниевой, селенитовой обогатитель
ной. селенит-цистиновых средах инкубируют при температуре (37 ± 1)°С в течение (24 ± 3)ч.
При посеве на модифицированную полужидкуюсреду MSRV0,1 см3культурыизсредыдляпредва
рительного неселективного обогащения пересевают на поверхность MSRVсреды. Для большей селек
тивности допускается распределить посевную дозу (0.1 см3) на три точки внесения по центру чашки
Петри. Посевы, намодифицированной полужидкойсреде MSRVинкубируютв течение (24 ± 3) ч при тем
пературе (41.5 i 1.0) °С. Чашки Петри не переворачивают. При отсутствии роста через (24 ± 3)ч посевы
дополнительно инкубируют в течение (24 ± 3)ч. Для подвижных штаммов сальмонелл характерендиф
фузный рост в толщеэтой среды от центра к периферии.
8.2.2 Надругихсредах(см. 7.4.36), предназначенныхдляселективного обогащения, посевы инку
бируют при температуре и сэкспозицией поинструкции по ихприменению.
8.2.3 Прямой посев в среды для селективного обогащения
Продукты свежие, которые не были подвергнуты каким-либо физическим воздействиям (сушке,
заморозке и другим воздействиям), допускается высевать непосредственно в селективные среды,
исключая этап предварительного неселективногообогащения.
Соотношение между количеством высеваемого продукта и количеством селективной среды 1:10:
(25.0 ± 0.1)г пробы на (225.0 ± 0,1) см3среды. Вслучае объединения навески продукта — по 8.1.3.
8.3 Выделение чистой культуры на дифференциально-диагностических агаризованных
средах и идентификация
8.3.1 Длявыделениячистой культурыпослеинкубирования населективныхсредахпо8.2 проводят
высев посевного материала на две агаризованные дифференциально-диагностические среды: на
XLD-arap (см. 7.4.13)и наоднуизсред: висмут-сульфитныйагар (см. 7.4.8), среду Плоскирева(см. 7.4.9),
среду Эндо (см. 7.4.10). средуЛевина (см. 7.4.11). бриллиантово-зеленый агар (см. 7.4.12).
Для получения отдельных хорошо изолированных колоний бактериологической петлей (1 мкл)
берут минимальное количество посевного материала и проводят высев штрихом по ГОСТ 26670 на
поверхностьчашек Петри с подсушеннымидифференциально-диагностическими средами.
С модифицированной полужидкой MSRV среды (см. 8.2.1) бактериологической петлей (1 мкл)
берут материал с границы зоны диффузного роста, осторожно касаясь поверхности среды, не захваты
вая сам агар, ипереносят на поверхностьдифференциальнойсреды штрихом по ГОСТ 26670.
Чашки Петри с посевами переворачивают вверх дном, помещают в термостат при температуре
(37 ± 1) °С и инкубируют в течение (24 ±3) ч. Предварительный учет результатов проводят через
(24 i 3)ч. окончательный — через (48 ± 3)ч.
8.3.2 После инкубирования проводят просмотр чашек Петри на присутствие типичных или не
совсемтипичных(подозрительных) колоний (при ростенаконкретнойдифференциально-диагностичес
кой среде)для бактерий рода Salmonella. Выбранные колонииотмечают надне чашки Петри для прове
дения последующей идентификации.
Бактерии рода Salmonella образуют:
- на XLD-arape:
колонии счерным центром и слегка прозрачной зоной красноватого цвета, что принадлежит цвету
индикатора.
5