ГОСТ Р 53665—2009
Для определения биохимических свойств используют специальные среды: трехсахарный агар
Олькеницкого (см. 7.4.25), среды Гисса (см. 7.4.17) либо одну из комбинированных сред: Клиглера
(см. 8.4.22), Ресселя-ГРМ (см. 7.4.24) и другие комбинированные среды по7.4.36.
Для посевов в специальные среды подготовленный материал по 8.4.1 отбирают бактериальной
петлей с поверхности ицентра колонии, не касаясь поверхности агара. Исследуют не менеетрех типич
ных колоний из каждойчашки.
Полученный материал засевают штрихом по поверхности скошенной среды и уколом по центру
столбика в его толщу.
Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение (24 ± 3) ч, после чего просматривают.
8.4.3.1 Определение ферментации сахаров
Для определения ферментации сахаров используют одну из сред по 8.4.3. Посев и инкубирова
ние — по 8.4.3.
Интерпретация результатов поизменениям среды
Агар Клиглера содержит два сахара, поэтому по скошенной поверхности учитывают только фер
ментацию лактозы:
- малиновый цвет скошенной поверхности среды указывает на ферментацию лактозы.
Среда Олькеницкого:
- пожелтение самого столбика среды указывает на ферментацию глюкозы (глюкоза положитель
ная);
- пожелтение скошенной поверхности среды указывает на ферментацию лактозы и/или сахарозы
(лактоза и/илисахароза положительная);
- красный или неизменившийся столбик среды указывает на отсутствие ферментации глюкозы
(глюкозаотрицательная):
- красная или неизменившаясяскошеннаяповерхностьсреды указываетнаотсутствие фермента
ции лактозы и/илисахарозы (лактоза и/или сахароза отрицательная);
- пузырьки или разрывы в толщесреды указывают на образование газа из глюкозы;
- черный цвет среды указывает на образование сероводорода.
TSI-arap:
- пожелтение поверхности TSI-arapa (см. 7.3.18) указывает на ферментацию лактозы (лактоза
положительная).
Типичные культуры бактерий рода Salmonella показывают щелочную (красную) поверхностьи кис
лый (желтый) столбике образованием газа (пузырьков).
Определение ферментации маннита исахарозы
Для определения ферментации маннита илисахарозы используют среды Гисса (см. 7.4.17)с ман
нитом или сахарозой. Посев иинкубирование — по8.4.3.
При ферментацииманнита цветсреды изменяется.
Бактерии рода Salmonella: ферментируют глюкозусобразованием кислоты и газа или кислоты без
образования газа: ферментируют маннит с образованием кислоты; не ферментируют лактозу и саха
розу.
Определениеферментации сахаров с помощьюдисков с углеводами
Для определения ферментации бактериями рода Salmonella сахаров допускается использование
дисков с углеводами (см. 7.3.9). Методика проведения испытаний по инструкции производителя.
8.4.3.2 Определение образования сероводорода
Для определения образования сероводорода используютодну из питательныхсред: Олькеницко
го(см. 7.4.25)илисредуКлиглера(см. 7.4.22),или 1%-нуюпептонную воду(см. 7.4.33). Посевы инкубиру
ют при температуре (37
а
1)°С в течение от 24до 72 ч.
При посеве культуры в одну из комбинированных сред об образовании сероводорода судят по
почернению среды в столбике.
Типичные культуры бактерий рода Salmonella примерно в 90 % случаев образуют сероводород
(черный цвет среды).
8.4.3.3 Дальнейшемуизучению подвергаюткультуры стипичными или несовсем типичнымисвой
ствами для бактерий рода Salmonella: бактерии, ферментирующие глюкозу с образованием или без
образованиягаза, а такжелактозоположительные бактериии бактерии, необразующиесероводород, но
обязательно ферментирующие глюкозу собразованием или без образования газа.
8.4.3.4 Определение расщепления мочевины
При определении расщепления мочевины используют агар Кристенсена с мочевиной (см. 7.4.15),
агар тройной сахарный по 7.4.14 или другие среды по 7.4.36.
7