ГОСТ Р 53408—2009
6.7.1.15 Алюминий хлористый 6-водный [AICI3- 6Н20]. с содержанием основного вещества не
ниже 99 %. Fluka, каталожный номер 7784-13-6.
6.7.1.16 Рутин. ГСО.
Допускается применениедругихсредствизмерения, вспомогательныхустройстви оборудованияс
метрологическими и техническими характеристиками не хуже, а также реактивов по качеству ичистоте
не ниже вышеуказанных.
6.7.2 Подготовка киспытанию
6.7.2.1 Приготовление 5 %-ногораствора хлористого алюминия в 60 %-ном этаноле
В конической колбе вместимостью 250см3по ГОСТ25336 взвешивают(5.000±0,001) гхлористого
алюминия, растворяют в (50,0 ± 0.5) г 60 %-ного этанола, массу раствора доводят до (100.00
1
0,01) г 60
%-ным этанолом итщательно перемешивают. Срокхранения раствора — не болееодного года.
6.7.2.2 Приготовление раствора ГСО рутина
(0.050
1
0.001)г ГСО рутина взвешивают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью
50см3поГОСТ 1770.добавляют40см360%-ногоэтанола,нагреваютдо50вС — 60 °Сивыдерживаютдо
полногорастворения рутина. Затем охлаждаютдо комнатной температуры, доводятдо метки 60 %-ным
этанолом итщательно перемешивают..
6.7.2.3 Построение калибровочного графика
В две мерные колбы вместимостью 25 см3 по ГОСТ 1770 дозатором вносят по0,2 (0.4:0,6; 0.8,1.0 и
1.2) см3раствора рутина по6.7.2.2 с концентрацией 1мг/см3; воднуколбудобавляют4см3раствора хло
ристого алюминия по 6.7.2.1 (рабочий раствор), доводятдо метки обе колбы 60 %-ным этанолом и
тща тельно перемешивают. Через 30 мин измеряютоптическую плотностьрабочих растворов
относительно растворовсравнения (рутинбез хлористогоалюминия)в интервале 390—420 нмнадлине
волны макси мума поглощения в кюветахс толщинойоптического слоя 1см.
При построении калибровочного графика на оси абсцисс откладывают количество рутина в мил
лиграммах. содержащегося в 25 см3рабочего раствора, а по оси ординат — максимальное значение
оптической плотности в указанном диапазоне.
Калибровочный графикдолжен бытьлинейным и проходитьчерез началокоординат.
6.7.2.4 Подготовка пробы
(1.000 i 0,001) г измельченной перги взвешивают в конической колбе вместимостью 100 см3по
ГОСТ25336. добавляют (30.010.5) см3 60 %-ного этанола, колбуприсоединяют к обратномухолодиль
нику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин, периодически встряхивая для смывания
частиц перги со стенок. Надосадочную жидкость фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 см3 так.
чтобы частицы перги не попали на фильтр.
Экстракцию флавоноидовповторяютещедважды вописанных вышеусловиях, прибавляя костат
ку по (30.0 • 0,1) см3 60 %-ного этанола. Фильтраты объединяют, охлаждают до (20 i 3) °С идоводятдо
метки (100,0± 0.01)см360 %-ным этанолом.
6.7.3 Проведение испытаний
В две мерныеколбы вместимостью25см3дозатором вносят по(5.00» 0,01)см3экстракта поб.7.2.4.
В одну колбу (анализируемый раствор) добавляют (4,0 ± 0.1) см3 раствора хлористого алюминия по
6.7.2.1, обеколбыдоводятдо метки 60 %-ным этаноломитщательно перемешивают. Через30мин
изме ряют оптическую плотность анализируемого раствора относительно раствора сравнения
(экстракт без хлористого алюминия) в интервале 390—420 нм на длине волны максимума
поглощения в кюветах с толщиной оптического слоя 1см.
По калибровочному графику, знаяоптическую плотностьанализируемого раствора, находят коли
чество рутина в миллиграммах в 25 см3 раствора.
6.7.4 Обработка и представление результатов испытаний
Массовую долю флавоноидов в пересчете на рутин (X,).%. вычисляют поформуле
v в С-100-100100
(2)
’ ~ т
5 1000 (100-W)
где С — количество рутина в 25 см3,найденное по калибровочному графику, мг;
100 — объем экстракта, см3;
100 — пересчет в %;
т — масса перги, взятойдля анализа, г;
5 — объем экстракта, взятогодля анализа, см3:
1000 — перевод миллиграммов в г;
юо_
---------------пересчет на абсолютно сухое вещество.
(100 -w )
9