ГОСТ Р ИСО 11133-2—2008
5.2.1.3 Условия инкубации
Инокулированные культуральные среды инкубируют с соблюдением условий, описанных в соот
ветствующем стандарте и приведенных всоответствующих таблицах приложения В.
5.3Методы, применяемые в отношении твердых культуральных сред
5.3.1 Метод количественного культивирования
5.3.1.1 Общие положения
Это обычный метод, пригодный для большинства твердых культуральных сред. Он может быть
непригодным для испытаний некоторых видов плесневых грибов.
5.3.1.2 Процедура
Используют рабочие культуры всоответствии с 5.2.1.
Отбирают надлежащее число чашек, которые являются представительными для каждой партии,
подлежащей испытаниям, иобеспечивают правильное высушивание поверхности каждой чашки. Чашки с
эталонной средой готовят аналогичным образом.
По поверхности испытуемых и эталонных чашек распределяют инокулят разбавленной рабочей
культуры с целью внесения количества, которое входит в рекомендуемые пределы, приведенные в
5.2.1.
П р и м е ч а н и е — Может также использоваться чашечный метод для культуральных сред, обычно приме
няемых для подсчета таким образом.
Чашки инкубируют в соответствующих условиях, как это установлено в соответствующих стан
дартах.
Проводят подсчет колоний, присутствующих в каждой чашке или в каждой капле, по обстоя
тельствам. Оценивают размер ивнешний вид колоний
5.3.1.3 Расчеты
Исходя из объема, распределенного на чашках, и фактора разбавления, можно рассчитать сред
нее количество микроорганизмов всреде. Вслучав использования капельных методов необходимо при
нимать во внимание количество капель и их объем.
5.3.1.4 Интерпретация результатов
Для интерпретации результатов следует рассчитать коэффициент производительности PR
(см. 5.2.3.2) или фактор селективности Sf (см. 5.2.3.3).
5.3.2Полуколичественный метод штриховой разводки, основанный на экометрии
5.3.2.1 Общие положения
Метод штриховой разводки пригоден для эксплуатационных испытаний твердых и жидких культу
ральных сред, данный метод является только полуколичественным. Таким образом, показатели роста
являются лишь ориентировочными, ион может рассматриваться только какдополнительное испытание
твердых культуральных сред.
При использовании данного метода испытуемые культуральные среды необходимо высушить до
одной и той же степени, и вся процедура должна быть стандартизирована, чтобы можно было сравни
вать результаты, полученные для различных партий.
5.3.2.2 Процедура
Чашки сагаром готовят обычным способом, используя около 15 см3агара. Среды, обычно исполь
зуемые вчашечном методе, напримерагарсчашечным подсчетом, могуттакже подвергаться испытани
ям поверхностным культивированием на затвердевших средах.
Используют рабочие культуры, какэто описано в5.2.1.
Вчашкиделают посев штрихом, какэто показано на рисунке 1. используя петлю на 1мкп. Проводят
четыре параллельные линии петлей с интервалом приблизительно 0.5 см всекторе А. Штриховую раз
водку повторяют для секторов В и С и завершают всекторе D одной линией. Для помощи ввыполнении
точной штриховой разводки под чашкой можноиспользовать шаблон.
Соблюдают время и температуру инкубации, установленные встандартных методах.
П р и м е ч а н и е — В культуру необходимо погружать только петлю, но не проволоку. Петля должна быть
полностью заполнена культурой. Избыточную жидкость удаляют трехкратным нажатием на расширенную часть пет
ли. используя край емкости. При нанесении штриховой разводки угол между петлей и поверхностью агара должен
быть от 20 * С до 30 аС . Давление петли на поверхность агара и скорость проведения штриховой разводки должны
быть всегда соразмерны. Следует избегать погружения петли в культуру, если на поверхности бульона имеются пе на
и/или пузыри.
5